JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:14 דק' • October 30th, 2025
התחילו עם תמצית שמרי טוד-יואיט סטרילית, או צלחת אגר THY, מדיום עשיר בחומרים מזינים התומך בצמיחה של סטרפטוקוקוס מיטיס, חיידק פתוגני.
בעזרת לולאה סטרילית, פס את הצלחת עם זן החיידקים.
מניחים את הצלחת המחוסנת בצנצנת נרות, מדליקים נר, אוטמים את הצנצנת אטומה ודוגרים.
הנר הבוער צורך חמצן ומעלה את רמות הפחמן הדו חמצני, ויוצר סביבה מיקרואירופילית המחקה תנאים דמויי מארח.
החומרים המזינים במדיום והסביבה המיקרואירופילית של הצנצנת משפרים את התפשטות החיידקים ומקדמים התפתחות של פנוטיפ אלימות.
לאחר הדגירה, הסר את מכסה הצנצנת והחזיר את הצלחת.
בעזרת לולאה סטרילית, בחרו מושבה מבודדת אחת והעבירו אותה לצינור חרוטי סטרילי המכיל מרק THY.
דגירה של התרבית בתנאים סטטיים כדי לתמוך בצמיחת חיידקים תוך שמירה על פנוטיפ האלימות.
תרבית זו יכולה לשמש כמודל פתוגני לחקירת אינטראקציות מארח-פתוגן.
לפני הכנת סטרפטוקוק מקבוצת Mitis, יש לחמם את צלחות האגר THY באינקובטור ל-37 מעלות צלזיוס.
לאחר מכן, השתמש בלולאה סטרילית כדי לפספס זנים רצויים של סטרפטוקוקi על הצלחות.
לאחר מכן, הכניסו את הצלחות לצנצנת נרות, ודגרו על הצנצנת בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך כ-18 שעות כדי לספק סביבה מיקרואירופילית.
למחרת, הוציאו את הצלחות מצנצנת הנרות והשתמשו בלולאה סטרילית כדי לבחור מושבות מבודדות.
יש לחסן צינורות חרוטיים סטריליים בנפח 15 מיליליטר המכילים 2 מיליליטר של מרק THY.
סגור את המכסים היטב ודגר את הצינורות ב-37 מעלות צלזיוס בתנאים סטטיים.