אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 3:54 דק׳ • October 30th, 2025
התחל בתרבית של ציאנובקטריה, שהם חיידקים פוטוסינתטיים.
חיידקים אלה מכילים טיפות פלסטוגלובול עשירות בשומנים וממברנות תילקואיד, שהם מבנים קרומיים מקופלים העשירים בפיגמנטים פוטוסינתטיים.
צנטריפוגה את התרבית והשליכו את הסופרנטנט כדי להסיר פוליסכרידים חוץ-תאיים המיוצרים על ידי חיידקים. שטפו את הגלולה ואז השעו אותה מחדש במאגר.
השתמש בהומוגנייזר בלחץ גבוה כדי ליצור כוח גזירה, המשבש את דפנות התאים והממברנות.
קרע של ממברנות התילקואיד משחרר פיגמנטים פוטוסינתטיים לתוך הליזאט. שחרור הפיגמנט גורם לשינוי צבע המעיד על שיבוש תאים ושחרור פלסטוגלובול.
טען את הליזט לצינורות צנטריפוגה, ולאחר מכן הוסף תמיסת סוכרוז ליצירת שיפוע צפיפות.
צנטריפוגה להפרדת רכיבים סלולריים לפי צפיפות.
התילקואיד ורכיבים כבדים אחרים מתגלגלים בתחתית, בעוד שהפלסטוגלובולים בצפיפות נמוכה צפים למעלה כרצועה נפרדת.
אסוף את שבר הפלסטוגלובול ואחסן אותו על ידי הקפאה להמשך ניתוח.
גדל 50 מיליליטר של תרבית PCC 6802 מזן synechocystis במדיה BG11 למשך 7 עד 10 ימים כדי להגיע לשלב הנייח.
בעזרת ספקטרופוטומטר, התאם את צפיפות התא לצפיפות אופטית של 2.0 ב-750 ננומטר. כדי להסיר את הפוליסכרידים, צנטריפוגה 50 מיליליטר תרבית והסירו את הסופרנטנט. חזור על שטיפת התאים ב -50 מיליליטר מאגר A פעמיים.
השעו מחדש את הכדור השטוף ב-25 מיליליטר של מאגר A ושברו את התאים באמצעות
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים