שיבוש מכני של תולעים בודדות להערכת שונות באינטראקציות בין חיידקים מארחים

התחל עם תולעי C. elegans בוגרות תואמות גיל, סטריליות וטריות עם ציפורניים חדירות, תלויות בבופר.

תולעים אלו נגועות בחיידקים בדרכי המעיים שלהן.

קח צלחת באר עמוקה המכילה חלקיקים שוחקים במאגר והעביר תולעת בודדת לכל באר.

מכסים את הצלחת בסרט איטום ומכסה.

דגרו את הצלחת בטמפרטורה נמוכה כדי למנוע התחממות יתר במהלך שיבוש הרקמות.

לחץ על המכסה כדי לאטום את הבארות.

בעזרת משבש רקמות, נענע מכנית את הצלחת. החלקיקים השוחקים משבשים את רקמות התולעת ומשחררים חיידקי מעיים.

הקש על הצלחת וצנטריפוגה כדי לגלול את התכולה.

מערבבים את התוכן כדי להפיץ את החיידקים באופן שווה, ואז מעבירים אותם לבארות טריות.

לדלל באופן סדרתי את תרחיף החיידקים במאגר.

צלחת את הדילולים על צלחות אגר ודגירה כדי לאפשר היווצרות מושבה.

ספרו את המושבות כדי לכמת את השונות בעומסי חיידקי המעיים על פני תולעים בודדות.

כדי להתכונן לשיבוש מכני של תולעים, השג צלחת באר סטרילית בעומק שני מיליליטר עם 96 בארות וכיסוי צלחת סיליקון.

השתמש במרית כף סטרילית כדי להוסיף כמות קטנה של סיליקון קרביד סטרילי 36 רשת לכל באר כך שהרשת בקושי מכסה את קרקעית הבאר. הוסף 180 מיקרוליטר של מאגר תולעת M9 לכל באר. סמן את העמודות והשורות ולאחר מכן כסה את הצלחת באופן רופף במכסה לוחית הסיליקון.

לאחר מכן, העבירו את התולעים החדירות לצלחת פטרי קטנה עם M9TX-01 מלא עד לעומק של סנטימטר אחד. בעזרת