אבולוציה אדפטיבית של חיידקים באמצעות מערכת תרבית מיקרו-טיפות מיקרוביאלית

הזרקת תרבית חיידקים המהונדסת לסבילות למתנול לבקבוק מגיב אחד ומדיום לחץ עם ריכוז מתנול גבוה לבקבוק אחר.

הוסף שמן לשניהם והניח אותם במערכת תרבית מיקרו-טיפות מיקרוביאלית כדי להגיע לטמפרטורת הדגירה.

בעזרת משאבה דוחפים את הנוזלים דרך שבב מיקרופלואידי.

תרבית החיידקים מתערבבת עם מדיום הלחץ. השמן מפריד את התערובת למיקרו-טיפות, הנעות קדימה ואחורה לגידול.

בתחילה, מתח מתנול גבוה מאט את צמיחת החיידקים.

עם הזמן, חלק מהתאים רוכשים מוטציות המשפרות את ניצול המתנול ומתרבות.

המערכת מודדת את צפיפות החיידקים ובוחרת טיפות המראות צמיחה גבוהה יותר.

אלה מעורבבים מחדש עם מדיום הלחץ כדי להעשיר לניצול גדול יותר של מתנול.

לאחר מספר מחזורים, מחלצים טיפות בעלות צפיפות חיידקים גבוהה, מורחים אותן על אגר ודוגרים.

לבודד ולתרבית את המושבות שנוצרו במדיום נוזלי כדי להשיג זנים מותאמים למתנול.

הזרקו את הכמויות הנדרשות של תמיסת החיידקים הראשונית, המדיום הטרי ושמן MMC לבקבוקי הריאגנטים המעוקרים הנפרדים לתמיסת החיידקים הראשונית במדיום הטרי, כפי שהוסבר קודם לכן.

כדי לבחור את הפונקציה של אבולוציה אדפטיבית, לחץ על ALE בתוכנה. בממשק הגדרת הפרמטרים, הפעל את מתג זיהוי OD, ולאחר מכן הגדר את כל הפרמטרים המתוארים בכתב היד ולחץ על התחל לשונית כדי להתחיל ביצירת טיפות. התהליך ייקח כ -25 דקות.

במהלך כל תקופת תת-גידול, שימו לב אם ערכי ה-OD המקסימלי