Name: דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-06T17:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 28 s
Description: למדו ליצור מודל עכברים לשבץ מוחי איסכמי באמצעות חסימת העורק התיכון הספיגה מוחין בנימה תוך-עורקית. שיטה זו מאפשרת חקר גרעיניות ותפקוד עצבי בחיות מודל.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו מומנה על ידי תוכנית המסגרת השביעית של הקהילה האירופית (FP7/2007-2013) מענק לפי הסכם n ° 201024 ו n ​​° 202213 (רשת שבץ האירופי). מימון נוסף ניתנה על ידי für Bundesministerium Bildung und Forschung (המרכז לחקר שבץ ברלין), ואת Forschungsgemeinschaft דויטשה (Exzellenzcluster NEUROCURE). המחברים מבקשים להודות Mareike Thielke (Dep. עבור Experimental Neurology, Charité ברלין) על התמיכה במהלך המבצע אלקה לודוויג (Charité שירותי וידאו) להפקת האנימציה.

כדי להבטיח איכות reproducibility גבוהה, אנו ממליצים על שימוש נהלי עבודה סטנדרטיים (SOP). בסרטון הזה, SOPs שפורסם התפתח בשימוש במעבדה שלנו מוחלים 1. 1. התיכון חסימת העורקים מוחין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם מורדמים עם המשטר הרדמה המתאים להתייעץ עם צוות וטרינרי. (אינדוקציה למשל עם 1.5 - 2% Isoflurane ותחזוקה עם 1.0-1.5% Isoflurane ב 2 / 3 N 2 O ו - 1 / 3 O2 שימוש במכשיר אידוי). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טמפרטורת הגוף של העכברים נשמר 36.5 ° C ± 0.5 מעלות צלזיוס במהלך הניתוח עם צלחת החימום. חימום מבוקר משוב כרית, אשר מחמם על פי הטמפרטורה בפי הטבעת של העכבר, מומלץ מאוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את העור שמסביב פרווה עם סוכן מתאים (למשל 70% אתיל אלכוהול) ויבש אותו לאחר מכן. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חתך בצוואר קו האמצע הוא עשה את הרקמות הרכות נמשכים מזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עורק התרדמה השמאלי משותף (LCCA) הוא גזור בקפידה ללא העצבים הסובבים (מבלי לפגוע עצב מחנק) ו ליגטורה נעשית באמצעות 6.0/7.0 מחרוזת. מחרוזת 5.0 יכול לשמש גם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עורק התרדמה השמאלי חיצוני (LECA) מופרד אז הקשר השני הוא עשה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב הבא, עורק התרדמה הפנימי השמאלי (LICA) מופרד קשר מוכנה עם נימה 6.0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר השגת תצפית טובה על עורק התרדמה הפנימי השמאלי (LICA) ואת pterygopalatine העורק השמאלי (אמ"ע), העורקים הן מקוטע, באמצעות קליפ כלי הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חור קטן הוא חתך LCCA לפני שהוא bifurcates את LECA ואת LICA. Monofilament עשוי ניילון 8.0 מצופה בתערובת hardener סיליקון (ראו להלן) הוא הציג אז אל LICA, עד שייעצר על קליפ. שימו לב יש לשלם לא להיכנס עורק העורפית. (איור 1) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העורקים מקוטע נפתחים בעוד נימה מוכנס לתוך LICA כדי לחסום את המקור של LMCA במעגל של ויליס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקשר השלישי על LICA סגור כדי לתקן את הסיב בעמדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העכברים לקבל 0.5 מ"ל תמיסת מלח תת עורי כמו חידוש נפח. להקלה על הכאב, לידוקאין הוא ג'ל למריחה על העור, בתוך הפצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם reperfusion נועד, עכברים להישאר 30-90 דקות חסימה בכלוב מחומם, הפצע יכול להיות סגור עם קליפ תפר קטן. לאחר מכן, הרדמה השני הוא ביצע, את הקשר השלישי הרשפ"ת היא רגעית נפתחה החוט נסוגה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התפרים הנותרים הם קיצרו את העור מותאם עם תפר כירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל בעלי החיים מקבלים חידוש הכרך השני כמתואר לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חיות הן לשים בכלוב מחומם למשך שעתיים כדי לשלוט על טמפרטורת הגוף. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים חייבים להיבדק מדי יום לאחר הניתוח סימנים של אי נוחות. העכברים יכול להראות כמה אובדן משקל שלאחר הניתוח. הם מקבלים מזון מחית בצלחת פטרי, שהונח על הרצפה כדי לעודד אכילה. האוכל מוחלף מדי יום במשך שבעה ימים. </li></ol></li></ol> 2. שאם מבצע <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור פעולות זיוף החוט מוכנס כדי לחסום LMCA ומסוגר באופן מיידי כדי לאפשר reperfusion מיידיות (1.8). המבצע הבאים זהה לזו של בעלי חיים שעברו ischaemia מוחין (1.9-1.14) כולל הרדמה השני. </li></ol> 3. הכנת החוט <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עקרות של החוט צריך להיחשב. שימוש בציוד עיקור וכן וטיפול הולם נימה לאחר מכן היא תנאי הכרחי ניתוח סטרילי. חיטוי של נימה היא קשה, שכן רבות מהשיטות הנפוצות עיקור עלולה להחמיר את איכות החוט. אולם שיטות כגון קרינה, למשל עם אור UV או קרני γ, או עיקור כימי, למשל עם גזים תגובתי כגון אתילן אוקסיד, תקפים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 8.0 חוט ניילון הוא חתך לתוך באורכים של 11 מ"מ מתחת למיקרוסקופ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קצה החוט חייב להיות מצופה לחלוטין באופן שווה על פני אורך של 8 מ"מ בתערובת של hardener Xantopren M רירית Activator NF Optosil </li></ol> 4. נציג תוצאות בהתאם תקופת ההגבלה זרימת הדם, מנוע שונה והתנהגותיים בעקבות גירעונות. גם אחרי 30 ו - 60 דקות של ischaemia מוחין, חיות ברוב המקרים להראות התנגדות ירד לדחוף לרוחב והקיפו בשל הפרעה לתנועה. פצעים קלים להתבטא במצב מכופף את li מולMBS. סימנים אלו נצפות בקלות יכול לשמש ציון בסיסי להצלחת המבצע. 2 מורפולוגית הנגע ניתן להעריך או באמצעות היסטולוגיה או תהודה מגנטית (MRI). שישים דקות חסימה של עורק המוח האמצעי מייצרת pannecrosis רקמה בשטח כולל בסטריאטום והן הניאוקורטקס, ואילו 30 דקות של ischaemia לגרום מוות של תאים עצביים בעיקר מוגבל בסטריאטום. 3 (איור 2) מבחינת היקף האוטם, אנו מצפים סטיית תקן נמוכה יותר מאשר 30% בערכה של פעולות. התמותה תלויה בזמן עם חסימה סביב 5% לאחר 30 דקות של ischaemia ו 10 - 20% לאחר 60 דקות. אפשרות נוספת פולשני מינימלי הוא השימוש לייזר דופלר flowmetry (LDF) במהלך המבצע, המאפשר שליטה ישירה של ההצלחה שלה. בשנת חיה בודדים, הפחתה עד 10 - 20% של ערכים preocclusion מצביע בבירור על גיוס מוצלח של איסכמיה מוחית מוקד 4 עם זאת, LDF אינו יכול לשמש כאמצעי להשוואות interindividual, מאז LDF יכול רק למדוד שינויים כמותיים (באחוזים) של דם. הזרימה בתוך נפח קטן ומוגבל דגימת רקמות. זה לא נותן מידע על היקף המרחבי של הפחתת זרימת הדם. 5 ישנן מספר בדיקות כדי להעריך את ההיבטים ההתנהגותיים לאחר שבץ, ניתוח כולל הילוך 6,7, Rotarod 8, הקוטב מבחן 9,10 הבדיקה, הסרת דבק 11,12, 13,14 גרם מדרגות מבחן, מבחן שלב בסולם 15,16 ו מבוך מוריס מים 17. בכל המבחנים הללו, עכברים נתון MCAo לבצע בהצלחה פחות מאשר בעלי חיים שליטה. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. Scheme של ארכיטקטורת כלי לספק את המוח (מתואר ברקע) ב העכבר. זנים שונים עשויים להציג וריאציות, למשל העורק העורפית לפעמים עלים בעורק התרדמה הפנימי. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. איור סכמטי של נגעים גדלים בדרך כלל אחרי נקודות זמן שונות של reperfusion במודל MCAo הפרוקסימלי. באמצע, במהלך אופייני של פעילות פונקציונלית זרימת הדם במוח לאחר MCAo מתוארים. (MCAo: חסימה בעורק המוח התיכון, LDF: לייזר דופלר למדידת זרם)

<ol><li>Dirnagl, U. Members of the MCAO-SOP Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+operating+procedures+%28SOP%29+in+experimental+stroke+research%3A+SOP+for+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Precedings%22%5BJournal%5D)">Standard operating procedures (SOP) in experimental stroke research: SOP for middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Nature Precedings. , (2010).</li>
<li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+middle+cerebral+artery+occlusion%3A+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li>
<li>Katchanov, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+neuronal+vulnerability+following+mild+focal+brain+ischemia+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Selective neuronal vulnerability following mild focal brain ischemia in the mouse.</a> Brain Pathol. 13, 452-464 (2003).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDirnagl%2C+U+%22Complexities%2C+Confounders%2C+and+Challenges+in+Experimental+Stroke+Research%3A+A+checklist+for+researchers+and+reviewers+in+Rodent+models+of+stroke%22">Complexities, Confounders, and Challenges in Experimental Stroke Research: A checklist for researchers and reviewers in Rodent models of stroke</a>. Dirnagl, U. , Springer. New York Dordrecht Heidelberg London. 267-267 (2010).</li>
<li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 9, 589-596 (1989).</li>
<li>Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+analysis+of+gait+impairment+after+experimental+stroke+and+the+therapeutic+effect+of+environmental+enrichment+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">A comprehensive analysis of gait impairment after experimental stroke and the therapeutic effect of environmental enrichment in rats.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 28, 1936-1950 (2008).</li>
<li>Lubjuhn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+testing+in+a+mouse+stroke+model+induced+by+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Functional testing in a mouse stroke model induced by occlusion of the distal middle cerebral artery.</a> J Neurosci Methods. 184, 95-103 (2009).</li>
<li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+quantiative+measurement+of+motor+inco-ordination+in+naive+mice+using+an+acelerating+rotarod%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The quantiative measurement of motor inco-ordination in naive mice using an acelerating rotarod.</a> J Pharm Pharmacol. 20, 302-304 (1968).</li>
<li>Matsuura, K., Kabuto, H., Makino, H., Ogawa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pole+test+is+a+useful+method+for+evaluating+the+mouse+movement+disorder+caused+by+striatal+dopamine+depletion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Pole test is a useful method for evaluating the mouse movement disorder caused by striatal dopamine depletion.</a> J Neurosci Methods. 73, 45-48 (1997).</li>
<li>Bouet, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+and+cognitive+deficits+after+transient+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor and cognitive deficits after transient middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Exp Neurol. 203, 555-567 (2007).</li>
<li>Freret, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+administration+of+deferoxamine+reduces+brain+damage+and+promotes+functional+recovery+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Delayed administration of deferoxamine reduces brain damage and promotes functional recovery after transient focal cerebral ischemia in the rat.</a> Eur J Neurosci. 23, 1757-1765 (2006).</li>
<li>Modo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurological+sequelae+and+long-term+behavioural+assessment+of+rats+with+transient+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Neurological sequelae and long-term behavioural assessment of rats with transient middle cerebral artery occlusion.</a> J Neurosci Methods. 104, 99-109 (2000).</li>
<li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%22staircase+test%22%3A+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The "staircase test": a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J Neurosci Methods. 36, 2-3 (1991).</li>
<li>Baird, A. L., Meldrum, A., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+staircase+test+of+skilled+reaching+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">The staircase test of skilled reaching in mice.</a> Brain Res Bull. 54, 243-250 (2001).</li>
<li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+and+subcortical+lesions+impair+skilled+walking+in+the+ladder+rung+walking+test%3A+a+new+task+to+evaluate+fore-+and+hindlimb+stepping%2C+placing%2C+and+co-ordination%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination.</a> J Neurosci Methods. 115, 169-179 (2002).</li>
<li>Farr, T. D., Liu, L., Colwell, K. L., Whishaw, I. Q., Metz, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+alteration+in+stepping+pattern+after+unilateral+motor+cortex+injury%3A+a+new+test+strategy+for+analysis+of+skilled+limb+movements+in+neurological+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Bilateral alteration in stepping pattern after unilateral motor cortex injury: a new test strategy for analysis of skilled limb movements in neurological mouse models.</a> J Neurosci Methods. 153, 104-113 (2006).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J Neurosci Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+I%3A+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema. I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Endres, M., Dirnagl, U. Neuroprotective Strategies in Animal and in vitro-Models of Neuronal Damage: Ischemia and Stroke. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEndres%2C+M+%22Molecular+and+Cellular+Biology+of+Neuroprotection+in+the+CNS%22">Molecular and Cellular Biology of Neuroprotection in the CNS</a>. Alzheimer, C. , Kluver Academic and Landes Bioscience. New York. Vol. 513 455-474 (2003).</li>
<li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathobiology+of+ischaemic+stroke%3A+an+integrated+view%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22, 391-397 (1999).</li>
<li>Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Stroke+Model+Guidelines+for+Preclinical+Stroke+Trials+%281st+Edition%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Stroke+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Rodent Stroke Model Guidelines for Preclinical Stroke Trials (1st Edition).</a> J Exp Stroke Transl Med. 2, 2-27 (2009).</li>
<li>Chen, Y., Ito, A., Takai, K., Saito, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blocking+pterygopalatine+arterial+blood+flow+decreases+infarct+volume+variability+in+a+mouse+model+of+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Blocking pterygopalatine arterial blood flow decreases infarct volume variability in a mouse model of intraluminal suture middle cerebral artery occlusion.</a> J Neurosci Methods. 174, 18-24 (2008).</li>
<li>Tsuchiya, D., Hong, S., Kayama, T., Panter, S. S., Weinstein, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+suture+size+and+carotid+clip+application+upon+blood+flow+and+infarct+volume+after+permanent+and+temporary+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of suture size and carotid clip application upon blood flow and infarct volume after permanent and temporary middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Brain Res. 970, 1-2 (2003).</li>
<li>Beckmann, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+magnetic+resonance+angiography+non-invasively+reveals+mouse+strain+differences+in+the+cerebrovascular+anatomy+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">High resolution magnetic resonance angiography non-invasively reveals mouse strain differences in the cerebrovascular anatomy in vivo.</a> Magn Reson Med. 44, 252-258 (2000).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 13, 683-692 (1993).</li>
<li>Florian, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neurosci Lett. 438, 180-185 (2008).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 349, 130-132 (2003).</li>
<li>Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-regulated+model+of+focal+ischemia+in+the+mouse%3A+a+study+with+histopathological+and+behavioral+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes.</a> Stroke. 35, 1720-1725 (2004).</li>
<li>Shin, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+induced+hypertension+improves+blood+flow+and+oxygen+metabolism+in+transient+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Mild induced hypertension improves blood flow and oxygen metabolism in transient focal cerebral ischemia.</a> Stroke. 39, 1548-1555 (2008).</li>
<li>Bottiger, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cerebral+ischemia+due+to+cardiocirculatory+arrest+in+mice+causes+neuronal+degeneration+and+early+induction+of+transcription+factor+genes+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Mol+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Global cerebral ischemia due to cardiocirculatory arrest in mice causes neuronal degeneration and early induction of transcription factor genes in the hippocampus.</a> Brain Res Mol Brain Res. 65, 135-142 (1999).</li>
<li>Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+induced+prolonged+protection+against+cerebral+ischemia+in+mice%3A+a+redox+sensitive+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism.</a> Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).</li>
<li>Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+stroke+protection+by+physical+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of stroke protection by physical activity.</a> Ann Neurol. 54, 582-590 (2003).</li>
<li>Gertz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+activity+improves+long-term+stroke+outcome+via+endothelial+nitric+oxide+synthase-dependent+augmentation+of+neovascularization+and+cerebral+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Physical activity improves long-term stroke outcome via endothelial nitric oxide synthase-dependent augmentation of neovascularization and cerebral blood flow.</a> Circ Res. 99, 1132-1140 (2006).</li>
<li>Richter, S. H., Garner, J. P., Wurbel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+standardization%3A+cure+or+cause+of+poor+reproducibility+in+animal+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Environmental standardization: cure or cause of poor reproducibility in animal experiments.</a> Nat Methods. 6, 257-261 (2009).</li>
<li>Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+systemic+immune+alterations+after+murine+focal+ischemia%3A+immunodepression+versus+immunomodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The spectrum of systemic immune alterations after murine focal ischemia: immunodepression versus immunomodulation.</a> Stroke. 40, 2849-2858 (2009).</li>
<li>Meisel, C., Schwab, J. M., Prass, K., Meisel, A., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+injury-induced+immune+deficiency+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Central nervous system injury-induced immune deficiency syndrome.</a> Nat Rev Neurosci. 6, 775-786 (2005).</li>
<li>Engel, O., Meisel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+Infection+Before+and+After+Stroke%3A+Investigating+New+Targets%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Disord+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Models of Infection Before and After Stroke: Investigating New Targets.</a> Infect Disord Drug Targets. 9, (2010).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+bedside%3A+the+quest+for+quality+in+experimental+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 26, 1465-1478 (2006).</li>
<li>Macleod, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Good+laboratory+practice%3A+preventing+introduction+of+bias+at+the+bench%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Good laboratory practice: preventing introduction of bias at the bench.</a> Stroke. 40, 50-52 (2009).</li>
<li>Group, S. T. A. I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+standards+regarding+preclinical+neuroprotective+and+restorative+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Recommendations for standards regarding preclinical neuroprotective and restorative drug development.</a> Stroke. 30, 2752-2758 (1999).</li>
</ol>

ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי Landesamt fuer גזונטהייד und Soziales, ברלין, גרמניה.

המודל של חולף, הפרוקסימלי MCA חסימה 18,19 המוצגים כאן מחקה את אחד הסוגים הנפוצים ביותר של שבץ איסכמי בחולים. סמך 20 פעמים reperfusion משתנה, המודל מציע דרגות שונות של נזק החל התקף איסכמי חולף (TIA) גדולים אוטמים כולל החלקים העיקריים של האונה איסכמי. זו מאפשרת לחוקר לבחון מנגנוני pathophysiological שונה לאחר שבץ. 20,21 הניתוח יכול להתבצע בתוך פרק זמן קצר ומייצרת נגעים לשעתקו מאוד. עם זאת, זה דורש בקרה מעמיקה של לערפלנים. 22 הבדלים קטנים בטכניקת הניתוח עשוי להסביר את השפעות שונות על האוטם. 23,24 יתר על כן, בשל סטיות באנטומיה של כלי הדם המוחיים, עכבר זנים שונים להראות תוצאה אחרת. 25,26 גוף הטמפרטורה משפיעה על נזק נוירולוגי, עם היפותרמיה המוביל נגעים קטנים 27 ו היפרתרמיה כדי גירעונות חמורים יותר. 28 לפיכך, בקרת טמפרטורה ותחזוקה רלוונטי ביותר במודל זה. 29 בנוסף, לחץ הדם ואת גזי הדם לערפלנים חשוב של התוצאה ואת הצורך להיות במעקב. 30,31 שימוש בשיטות פולשניות מהיר מינימלי (לא פולשנית למדידת לחץ דם, מתאים וקל נגיש אוסף אתרים דם) מומלץ. הבחירה של ההרדמה הוא גם חשוב מאוד, כמו כמה יש תופעות neuroprotective, ו / או להיות vasodilators, כמו למשל Isoflurane. 32 כתוצאה מכך, החשיפה הרדמה צריך להיות קצר ככל האפשר סטנדרטית. אנו לא כוללים חיות אשר עברו ניתוח דקות יותר מ 15. גילוח באתר כירורגית מייצרת microabrasions ודלקת ומשחרר שברי שיער. זה עשוי להגביר את הדלקת לטפח זיהום מקומי, אשר עשוי להשפיע על פתופיזיולוגיה שבץ. תנאי הדיור, במיוחד את השימוש העשרה, עשוי להשפיע על התוצאה שבץ צריך להיות סטנדרטי המתואר דוחות מחקר. 6,33,34 השימוש העשרת הסביבה והשפעתה על reproducibility היא עניין של דיון. Confounder 35 נוסף חשוב הוא הסיכון הנגרם משבץ עבור זיהום במיוחד לאחר פעמים יותר של ischaemia 36, אשר מוביל לתחלואה ותמותה מוגברת נוספים. 37,38 כמו זיהומים להיות סימפטומטי בסביבות יום 3-5, זה יש השלכות חשובות לטווח ארוך מעקב מודלים כאלה. כדי לייצר תוצאות רלוונטיות לפיתוח אסטרטגיות טיפול חדשנית סטנדרטיזציה שבץ, בקרת איכות חשוב ביותר במחקר קליני שבץ translational 39 &quot;נהלי מעבדה תקינים&quot; 40,41 מנדטים.: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תיאור הולם ומפורט של בעלי החיים המשמשים; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גודל המדגם חישוב ודיווח על גודל ההשפעה הצפויה; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכלה והדרה קריטריונים, הקים לפני המחקר; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אקראיות ההקצאה לקבוצות; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת הסתרה לגבי החוקרים; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיווח חיות מחוץ ניתוח; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערכה עיוור התוצאה; </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיווח התנגשויות פוטנציאליות של עניין מימון ללימודים. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>מספריים כירורגיים (לחיתוך עור)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>2 פינצטות Dumont (טיפ ישר, Medical #5)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>מספרי קפיץ (לפי ואנאס)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>שימוש בפינצטה עבור תפסני מיקרו (Micro clamps)</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>תפס מיקרו-וסקולרי (למשל S&amp;amp;G B1-V)</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td>ניתן להשתמש גם ב-Serrefine</td></tr><tr><td>2 תפסני המוסטט מסוג Hartmann</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחטים (לפי Olsen-Hegar או דגם אחר)</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה אנטומית סטנדרטית (לסגירת פצעים)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-12</td><td></td></tr><tr><td>תפרי 5/0 </td><td>סופראמה</td><td></td><td>עבור קשירות כלי דם</td></tr><tr><td>תפרי 6/0 </td><td>סופרמה</td><td></td><td>לתפירת עור, ניתן להשתמש גם ב-5/0</td></tr><tr><td>לידוקאין (למשל, Xylocain Gel 2%)</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>או לשיכוך כאבים מקומי אחר</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ סטריאוסקופי (מיקרוסקופ תלת-ממדי), הגדלה של 6x עד מקסימום 40x</td><td>Leica Zeiss</td><td>MZ6 Stemi2000C</td><td></td></tr><tr><td>מקור אור קר</td><td>Leica Microsystems</td><td>KL1500</td><td></td></tr><tr><td>מערכת פד חימום עם בקרת משוב של טמפרטורה</td><td>Fine Science Tools</td><td>21052-00</td><td>עם משטח לעכבר וגשש קטן</td></tr><tr><td>מערכת הרדמה לאיזופלורן</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>איזופלוראן</td><td>Abbott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תא התאוששות וטרינרי</td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td>כלוב מחומם</td></tr><tr><td>סיב ניילון 8.0</td><td>סופרמה</td><td>TEL181005</td><td>לציפוי</td></tr><tr><td>סקלפל</td><td></td><td></td><td>לחיתוך פילמנט לחתיכות</td></tr><tr><td>סרגל</td><td></td><td></td><td>לחיתוך filament באורך הנכון</td></tr><tr><td>Xantopren M Mucosa</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Activator Universal Plus</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td>Optosil - Xantopren</td></tr><tr><td>2 פינצטות Dumont (טיפ ישר, דגם Medical #5)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>משטח תמיכה רך לאחסון ואחיזה של הסיבים ללא הציפוי</td><td></td><td></td><td>למשל, מטושים, קצף, &amp;#8230;</td></tr><tr><td>מכל לסלילי הדפסה חדשים</td><td></td><td></td><td>למשל צלחת פטרי, ספוג גמיש,&amp;#8230;</td></tr></tbody></table>

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

שבץ מוחי הוא בין הגורמים השכיחים ביותר למוות ונכות מבוגר, במיוחד במדינות מפותחות. עם זאת, אפשרויות הטיפול עד כה מוגבלים מאוד. כדי לענות על הצורך גישות טיפוליות הרומן, שבץ מחקר ניסיוני לעתים קרובות מעסיקה מודלים מכרסמים ischaemia מוחי מוקדי. רוב החוקרים להשתמש חסימה קבועה או חולפת של עורק המוח האמצעי (MCA) בעכברים או חולדות. חסימה הפרוקסימלי של עורק המוח האמצעי (MCA) באמצעות טכניקת תפר intraluminal (מה שנקרא חוט להט או מודל תפר) הוא כנראה דגם הנפוצות ביותר בשימוש במחקר ניסיוני שבץ. המודל intraluminal MCAO מציעה את היתרון של גרימת ischaemia חולפת או קבועה לשחזור השטח MCA בצורה יחסית לא פולשנית. גישות Intraluminal לקטוע את זרימת הדם בכל השטח של העורק הזה. נימה חסימה ובכך מעצרים תזרים הפרוקסימלי של lenticulo-מפוספסים העורקים, אשר מספקים את הגרעינים הבזליים. נימה חסימה של תוצאות MCA בנגעים לשחזור בקליפת המוח ואת בסטריאטום והוא יכול להיות קבוע או חולף. לעומת זאת, מודלים גרימת דיסטלי (עם הסתעפות של lenticulo-מפוספסים העורקים) MCA חסימה בדרך כלל לחסוך בסטריאטום ובעיקר לערב את הניאוקורטקס. בנוסף המודלים האלה דורשים craniectomy. במודל הפגינו במאמר זה, חוט סיליקון מצופה מוחדר לעורק התרדמה המשותף ומתקדם לאורך בעורק התרדמה הפנימי לתוך המעגל של ויליס, שם הוא חוסם את מקורו של עורק המוח האמצעי. בחולים, occlusions של עורק המוח האמצעי הם בין הגורמים השכיחים ביותר של שבץ איסכמי. מאז במרווחים משתנים איסכמי ניתן לבחור בחופשיות במודל זה תלוי בנקודת הזמן של reperfusion, נגעים איסכמיים בדרגות שונות של חומרה יכול להיות מיוצר. Reperfusion על ידי הסרת החוט occluding לפחות חלקית מודלים החזרת זרימת הדם לאחר תמוגה (tPA) ספונטני או טיפולית של קריש תרומבואמבוליים בבני אדם. בסרט זה נציג את הטכניקה הבסיסית, כמו גם את החסרונות העיקריים לערפלנים אשר עלולה להגביל את ערך החיזוי של המודל הזה.

פילמנטיות חסימה של עורק המוח התיכון הוא מודל משותף לחקר שבץ איסכמי בעכברים.

שבץ מוחי הוא אחד הגורמים השכיחים ביותר למוות ולנכות בקרב מבוגרים, במיוחד במדינות מפותחות מאוד. עם זאת, אפשרויות הטיפול עד כה הן...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להוציא למערך מודל עכבר של איסכמיה מוחית מוקדית על ידי חסימת העורק המוחי האמצעי באמצעות חוט תוך-לומינלי. הדבר משיג על ידי ביצוע חתך קו אמצע בצוואר וחשיפה של העורק הקרוטיד המשותף. השלב הבא הוא קשירת ליגטורות סביב העורק הקרוטיד המשותף, כאשר נעשה שימוש בתפסני עורק קרוטיד חיצוני כדי להחזיק אותן במקומן ולמנוע דימום.השלב הסופי של הפרוצדורה הוא הכנסת הפילמנט לתוך מעגל ויליס (circle of Willis). פעולה זו חוסמת את הענף של העורק המוחי האמצעי, ובסופו של דבר גורמת לגירעונות נוירולוגיים. כתוצאה מכך, ניתן לזהות את החסימה באמצעות התבוננות בשינויים בהתנהגות.אחד היתרונות המרכזיים של חסימת MCA פרוקסימלית באמצעות טכניקת הפילמנט הוא שהיא מאפשרת יצירת נגעים בעלי הדירות גבוהה בסטרטום ובקורטקס. ניתן להחיל איסכמיה באופן קבוע או זמני, ויתרה מכך, מכיוון שחסימת MCA באמצעות פילמנט אינה דורשת קרניאקטומי, ניתן להחשיבה כפרוצדורה שהיא פחות או יותר לא פולשנית. בדרך כלל, אנשים שאינם מכירים את השיטה חווים קשיים בשל האופי העדין של טכניקות מיקרו-כירורגיות. לפני הפרוצדורה, הכינו את הפילמנט על ידי חיתוך פילמנט ניילון 8.0 לאורך של 11 מילימטרים תחת מיקרוסקופ.יש לצפות את קצה הסיב באופן מלא ואחיד לאורך של שמונה מילימטרים בתערובת סיליקון; מומלץ להשתמש בפרוטוקולי עבודה סטנדרטיים כדי להשיג תוצאות אופטימליות. סוג העכבר שבו משתמשים תלוי במטרת המחקר. באופן כללי, העכברים צריכים להיות בני יותר מ-10 שבועות.השתמש בחומרי הרדמה מתאימים בהתייעצות עם צוות וטרינרי. טמפרטורת הגוף של העכברים נשמרת סביב 36.5 °C במהלך הניתוח באמצעות פלטת חימום; הכן את אזור הניתוח, חטא את העור ואת הפרווה שמסביב, והמתן לייבוש. בצע חתך בקו האמצע לאורך הצוואר והרחק בעדינות את הרקמות הרכות.מבצעים דיסקציה זהירה של העורק הקרוטיד המשותף השמאלי, תוך הפרדתו מהעצבים הסובבים אותו מבלי לפגוע בעצב הוואגוס, וקושרים אותו באמצעות תפר במידה של 5.0 עד 7.0. לאחר מכן, מבודדים את העורק הקרוטיד החיצוני השמאלי וקושרים קשר שני. לאחר בידוד העורק הקרוטיד הפנימי השמאלי, קושרים סביבו קשר רופף.בעזרת חוט תפירה במידה 6.0, ייסגר הקשר בשלב מאוחר יותר של ההליך. לאחר השגת שדה ראייה טוב של העורק התוך-גולגולתי הפנימי השמאלי (left internal carotid artery) ושל העורק הטגו-פלטיני השמאלי (left tego palatine artery), שני העורקים ייסגרו באמצעות קליפס EC כדי להכין את השטח להחדרת החוט. חור קטן ייחטב בעורק התוך-גולגולתי המשותף (common carotid artery) לפני נקודת הפיצול שלו.את המוניפילמנט (monofilament) שהוכן קודם לכן מחדירים כעת אל העורק. את העורקים התחורים פותחים בזמן שהפילמנט מוחדר אל העורק הקרוטידי הפנימי. כדי לחסום את העורק המוחי האמצעי, סוגרים את הקשר השלישי על העורק הקרוטידי הפנימי.כדי לקבע את הפילמנט במקומו, יש למרוח ג'ל לידוקאין באופן מקומי על הפצע להקלה בכאב. בניתוחי דמה (sham operations), יש להחדיר את הפילמנט ולשלוף אותו מיד כדי לאפשר רפרופזיה מיידית, ולהזריק 0.5 milliliters של סליין באופן תת-עורי כהשלמת נפח. כדי לחקור את השפעות הרפרופזיה, יש לפתוח את הקשר השלישי ולהסיר את הפילמנט.פרק זמן קבוע לאחר איסכמיה, בדרך כלל לאחר 30 עד 60 דקות. בדוגמה זו, הפרפוזיה מורשית 60 דקות לאחר חסימת כלי הדם, והזריקה השנייה להשלמת הנפח של תמיסת סליין (saline) ניתנת. לבסוף, קצרו את שאריות התפרים וסגרו את העור באמצעות תפר כירורגי.הניחו את בעלי החיים בכלוב מחומם למשך שעתיים להתאוששות לאחר הניתוח, ובדקו את בעלי החיים מדי יום כדי לאתר סימני אי-נוחות. לאחר הניתוח עלול להתרחש ירידה במשקל, ולכן יש לספק לעכברים מזון רסוק שיונח בתוך צלחת פטרי על הרצפה, כדי לעודד אכילה.את המזון מחליפים מדי יום למשך שבעה ימים. משך הזמן של הגבלת זרימת הדם עשוי להוביל להבדלים בגירעונות מוטוריים והתנהגותיים. לאחר 30 או 60 דקות של איסכמיה מוחית, רוב בעלי החיים מראים ירידה בעמידות.דחיפה מאוחרת ותנועת מעגלים עקב הפרעה בניידות; נגעים קלים יותר מתבטאים במנח כיפוף של הגפיים הקדמיות. סימנים גלויים אלו יכולים לשמש כמדד בסיסי להצלחת הניתוח. ניתן להעריך את הנגע שנוצר באמצעות היסטולוגיה או דימות בתהודה מגנטית (MRI).כפי שניתן לראות כאן, חסימה של 60 דקות של העורק המוחי האמצעי גורמת לנמק רקמתי מקיף באזור הכולל הן את הסטריאטום והן את ה-, בעוד ש-30 דקות של איסכמיה גורמות בעיקר למות תאי עצב, המוגבל לסטריאטום. מנתחים מיומנים בביצוע MCAO יכולים לשלוט בטכניקה זו תוך 10 דקות. בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור לפעול לפי נהלי עבודה סטנדרטיים כדי להבטיח תוצאות הדירות ולשלוט במשתנים מתערבים.

modeling-stroke-mice-middle-cerebral-artery-occlusion-with-filament

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מדגימים את הוידאו שיטה לייצור באמצע חסימה בעורק המוח בעכברים בוגרים באמצעות monofilament intraluminal. כמו כן, אנו מראים כיצד להעריך את מידת אוטם מוחי על ידי מכתים 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC).

עכבר דגם ספיגה התיכון עורק מוחי

עורק המוח האמצעי intraluminal חסימה (MCAO) מודל הוא מודל בשימוש השכיח ביותר בקרב מודלים ניסיוניים שבץ איסכמי. להלן נדגים את המודל כולו בפירוט עם מדריך של flowmetry לייזר דופלר, והתוצאות מי מטעמה.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

סרטון זה מתאר את ההליך לפתח שבץ חולף במודל מורין באמצעות חסימה מבוססת נימה מצופה סיליקון של עורק המוח האמצעי. המודל שפותח מחקה שבץ אנושי, ובכך מסייע לחקור אסטרטגיות טיפוליות חדשניות לטיפול בשבץ.

מודל שבץ חולף מבוסס החדרת נימה: הליך כירורגי לביצוע חסימת עורק מוחי אמצעי במוח מורין

מודלים עכבריים שונים של חסימת עורק המוח אמצעית (MCAO) נמצאים בשימוש נרחב בחקר המוח ניסיוני. הנה, אנחנו מדגימים את המודל של MCAO דיסטלי הקבוע transcranial אשר מייצר אוטם קליפת המוח עקבי של גודל המתאים לנזק שהוטל על ידי הרוב המכריע של מקרי שבץ איסכמי אנושיים.

דוגמנות שבץ בעכברים: קרישה קבועה של עורקי דיסטלי התיכון מוחין

על מנת להבין את פתופיזיולוגיה של שבץ, חשוב להשתמש במודלים אמינים. מאמר זה יתאר את אחד דגמי שבץ הנפוצים ביותר בשימוש בעכברים, כינה את חסימת עורק המוח האמצעי (MCAo) המודל (המכונה גם נימת intraluminal או מודל תפר) עם reperfusion.

גישה ניתוחית עבור העורקים התיכון ספיגה מוחין ושבץ reperfusion מושרה של עכברים

שבץ מוחי הוא בעיה גלובלית עם אפשרויות טיפול מינימליות וללא טיפול קליני נוכחי לחידוש רקמת המוח האבודה. כאן אנו מתארים שיטות ליצירת שבץ פוטותרומבוטי מדויק בקליפת המוח המוטורית של מכרסמים והזרקה מאוחרת יותר של ביו-חומרים הידרוג'ל כדי לחקור את השפעתם על התחדשות רקמות לאחר שבץ.

הזרקת פיגומים ביו-חומרים הידרוג'ל למוח לאחר שבץ

מודלים שונים של אומת עורק המוח האמצעי (MCAo) משמשים במחקר שבץ ניסיוני. כאן, מודל שבץ ניסיוני של MCAo חולף דרך העורק הראשי החיצוני (ECA) מתואר, שמטרתו לחקות שבץ אנושי, שבו פקקת המוח מוסרת עקב תמוגה קריש ספונטני או טיפול.

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

פרוטוקול זה מדגים מודל שבץ עכבר ייחודי עם אוטם בגודל בינוני ושיעור הישרדות מצוין. מודל זה מאפשר לחוקרי שבץ פרה-קליניים להאריך את משך האיסכמיה, להשתמש בעכברים מזדקנים ולהעריך תוצאות תפקודיות ארוכות טווח.

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

פרוטוקול זה מתאר את המודל של איסכמיה מוחית מוקדית חולפת בעכברים באמצעות חסימה תוך לומינלית של עורק המוח האמצעי. בנוסף, דוגמאות להערכת תוצאות מוצגות באמצעות הדמיית תהודה מגנטית ומבחני התנהגות.

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

פרוטוקול זה מתאר את תהליך ההכנה לרפרפוזיה של חסימת עורק המוח התיכון דרך עורק התרדמה המשותף.

הכנת מודל שונה עבור זילוח חסימת עורק מוחי אמצעי

למדו ליצור מודל עכברים לשבץ מוחי איסכמי באמצעות חסימת העורק התיכון הספיגה מוחין בנימה תוך-עורקית. שיטה זו מאפשרת חקר גרעיניות ותפקוד עצבי בחיות מודל.

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

גלה סרטונים נוספים