חילוץ חיידקים אפופלסטיים באמצעות שיטת לחץ מבוססת מזרקים

קחו צמח Arabidopsis עם עלים מחוסנים מראש בחיידקים כדי לחקור אינטראקציות בין צמחים למיקרובים.

חיידקים אלו מתרבים באפופלסט, המרחב הבין-תאי בין תאי הצמח, ויוצרים מיקרוקולוניות.

לאחר התיישבות אפופלסטית, כריתת העלים ומניחים אותם במזרק ללא מחט.

הוסף מים מזוקקים לכסות את הרקמה.

הכניס את הבוכנה, ואז החזק את המזרק זקוף, הקיש עליו, וכיוון את הבוכנה לשחרור אוויר כלוא.

אוטם את הקצה בפארפילם כדי ליצור תא סגור להוצאת אפופלסט.

הפעילו לחץ חיובי על ידי דחיפת הבוכנה עד שהרקמה הופכת לכהה, מה שמצביע על דחיסה וחדירת מים למרחבים הבין-תאיים כדי להוציא חיידקים.

לאחר מכן, הפעילו לחץ שלילי על ידי משיכת הבוכנה להרחבת מטריצת הרקמה ולמשוך נוזלים וחיידקים החוצה.

חזור על מחזורי הלחץ כדי ליצור כוחות גזירה שמפריעים למיקרוקולוניות, ומשחררים חיידקים מבלי לפגוע ברקמת הצמח.

פתח את המזרק ואסף את הנוזל האפופלסטי המכיל חיידקים מפוזרים לניתוח נוסף.

ארבעה ימים לאחר החיסון, חתכו או את החלק האווירי של צמח הערבידופסיס או את העלה המחוסן מצמח השעועית והניחו אותו במזרק של 20 מיליליטר ללא מחט.

לגבי עלי השעועית, גלגלו את העלה על עצמו, והשאירו את הפנים האבקסיאליות החוצה. הוסף מספיק מים מזוקקים כדי לכסות את הרקמה. לאחר מכן, הכניסו את הבוכנה שמחזיקה את המזרק במצב זקוף והסרו את עודפי האוויר והאוויר בתוך המזרק על ידי טפיחה עדינה על הקנה עד שכל הא