אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 1:59 דק׳ • November 28th, 2025
התחילו בתרביות לילה של זני Vibrio cholerae , חיידקים פתוגניים שגדלו במדיום עשיר בחומרים מזינים.
צנטריפוגות את התרביות כדי להפיל את התאים. הסר את הסופרנטנט המכיל תרכובות חוץ-תאיות והחזיר את הכדור לתלוח.
לאחר מכן, טובל חיסון חוט סטרילי לתוך התרבית ודקור אותו אנכית לאגר התנועתיות כדי להניח את החיידקים מתחת לפני השטח ללא התפשטות צדדית.
חטא את החיסון בלהבה בין כל זן כדי למנוע זיהום צולב.
דגרו את הצלחת כדי לאפשר לחיידקים לנדוד דרך אגר התנועתי.
האגר מכיל טריפנילטראזוליום כלוריד, או TTC, אינדיקטור של רדוקס שהופך לאדום לאחר הפחתה על ידי תאים פעילים מטבולית.
זנים ניידים מפחיתים את ה-TTC על פני שטח רחב, ויוצרים אזור אדום גדול, בעוד שזנים לא ניידים מציגים כתמים המוגבלים לקו הדקירה.
גודל והתפשטות האזורים האדומים מצביעים על תנועתיות כל זן.
שטוף את כדור התאים שהתקבל מתרבית הלילה. לחסן לוחות אגר ניידים על ידי הכנסת דקירה לתוך התרבית הנוזלית השטופה ודקור אנכית לתוך המדיה.
ודא שהדקירה לא מתעקמת בזמן דקירה באגר. בין כל חיסון, חטא את הדקירה של החוט באמצעות מבער בונזן. דגרו את צד המכסה של הצלחות כלפי מעלה למשך 14-24 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס.
לאחר 14 שעות, יש לעקוב מקרוב אחר לוחות התנועתיות כדי למנוע גידול יתר של תרביות.