מבחן ווגס-פרוסקאואר להבדלת ביוטיפים של ויבריו כולרה

קחו תרביות נפרדות של Vibrio cholerae, חיידק פתוגני, המכיל שלושה ביוטיפים שונים: קלאסי, אל-טור מסוג פראי, ווריאנט אל טור, שכל אחד מהם מייצג תת-קבוצות גנטית שונות.

החסן כל תרבית לצינורות מלאים במדיום מיוחד לביצוע בדיקת Voges-Proskauer (VP).

דגרו עם ניעור כדי להקל על התרבות חיידקים.

ה-El Tor מהסוג הפראי מתסיס גלוקוז במדיום ומייצר אצטואין, בעוד שביוטיפים קלאסיים ושונים אינם עושים זאת.

לאחר מכן, מוסיפים α-נפתול ואשלגן הידרוקסיד לכל צינור, מערבבים היטב ודוגרים.

בנוכחות הידרוקסיד אשלגן, חמצן אטמוספרי מזרז את חמצון האצטואין לדיאצטיל.

דיאצטיל מגיב עם תרכובות המכילות קבוצות גואנידין במדיום ויוצר תוצר בצבע ורדרד-אדום, שעוצמתו מוגברת על ידי α-נפתול.

התפתחות הצבע מצביעה על תגובת VP חיובית, האופיינית לביוטיפ הבר El Tor, בעוד שהביוטיפוס הקלאסי והווריאטי אינם מראים היווצרות צבע.

החסנו 4 מיליליטר של מרק מתיל אדום Voges-Proskauer או MR-VP על ידי פיפטינג של 10 מיקרוליטר של תרבית לילה מוכנה מראש לתוך 4 מיליליטר של מרק MR-VP בצינור תרבית סטרילי ודגרו עם אוורור בדוגמת שייקר במהירות 225 סל"ד למשך 12-16 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, הוסיפו 150 מיקרוליטר עם משקל 5% לנפח של אלפא-נפתול ו-50 מיקרוליטר של 40% משקל לנפח אשלגן הידרוקסיד ל-1 מיליליטר של תרבית הלילה MR-VP במבחנות תרבית סטריליות, בהתאמה.

לאחר