אספקה מבוססת אלקטרופורציה של ביומולקולות פלואורסצנטיות לתאי חיידק

התחל עם קובטה מקוררת המכילה תלייה של תאי חיידק אלקטרוכשיריים, שיש להם רגישות מוגברת לחדירות ממברנה.

ההתנגדות מכילה גם מולקולות ביולוגיות המתויגות בפלואורופורים אורגניים.

הפעילו פולס חשמלי במתח גבוה ליצירת נקבוביות ממברנה זמניות, המאפשרים כניסת ביומולקולות לציטופלזמה.

הוסיפו מדיום עשיר בחומרים מזינים והעבירו את התאים לצינור. הדגירה לקידום תיקון הממברנה.

צנטריפוגה את התאים, ואז משליכים את הסופרנטנט המכיל ביומולקולות לא מופנמות.

החזירו את התאים לבופר עתיר מלח המכיל חומר ניקוי כדי לנתק מולקולות ביולוגיות דבוקות למשטח.

צנטריפוגה שוב, זרוק את הסופרנטנט, ותשהה מחדש את התאים בבופר.

העבר את המתלה למסנן ולצנטריפוגה כדי להשליך את הזרימה המכילה כל ביומולקולה לא פנימית. לאחר מכן, שטוף את התאים עם בופר טרי ותשהה אותם מחדש.

התקן את התאים על משטח אגרוז והניח כיסוי כיסוי. החיידקים המסומנים בפלואורסצנציה מוכנים לוויזואליזציה.

מתחילים במלאי של ביומולקולות פלואורסצנטיות המוכנות בבופר יוני נמוך, העבירו עד חמישה מיקרוליטר של הביומולקולות ל-20 מיקרוליטר של חיידקים מיומנים או ל-50 מיקרוליטר של תאי שמרים מקצועיים. כמות המולקולות הפלואורסצנטיות המוקדמות עם התאים קשורה ישירות לכמות הביומולקולות המופנמות לכל תא לאחר האלקטרופורציה.

דגרו את התערובת על קרח עד 10 דקות. במקביל, בחר קובטה אלקטרופורציה עם מרווח אלקטרודות מתאי