מעקב אחר צמיחת חיידקים ברזולוציית תא יחיד במערכת מיקרופלואידית

התחל עם מכשיר מיקרופלואידי המותקן על שלב מיקרוסקופ פלואורסצנציה הפוך.

המכשיר מורכב משבב פולימר עם תעלות הזנה אופקיות. כל תעלה מרופדת בסדרה של תעלות צרות שנאטמו בקצה אחד ומיועדות לכלוא תאי חיידק בשרשראות ליניאריות.

בתוך התעלות נמצאים תאים חיידקיים לא ניידים שמבטאים חלבון פלואורסצנטי, המאפשר את הדמיה שלהם.

כל ערוץ הזנה מחובר למשאבות מזרק שמספקות מדיום עשיר בחומרים מזינים בקצב זרימה מבוקר.

התחל את הזרימה כדי לאפשר לתווך להתפזר לתעלות ולתמוך בצמיחת חיידקים.

תאי חיידק כלואים מתחלקים בתוך התעלה ויוצרים שרשרת של צאצאים.

עיצוב התעלה מבטיח שתאים חדשים בקצה הפתוח יישטפו, מה שמאפשר מעקב ארוך טווח אחרי התאים הוותיקים ביותר.

לצלם תמונות של תעלות לאורך זמן כדי לעקוב אחר גדילה וחלוקה של תאי חיידק בודדים.

הרכבו בזהירות את המכשיר הטעון על הכנסת במה על ידי הדבקה של זכוכית הכיסוי משני צידי ה-PDMS לתחתית הכניסה לבמה. הפוך את מכלול מכשיר ההכנסת הבמה כך שה-PDMS פונה כלפי מעלה והניח אותו על משטח רך כמו מגב ללא אבק.

כוון את קצב הזרימה של משאבת המזרק פאזה אחת ל-35 מיקרוליטר לדקה. ואז עובדים עם נתיב אחד בכל פעם, מכניסים את מחט הכניסה ואז את מחט היציאה שמובילה לבקבוק הפסולת. לאחר בדיקה ויזואלית של המכשיר לאיתור נזילות, בדוק את צינור היציאה למראה של תאים עודפים המופיעים כפס עכור במניסקוס הבינוני, אשר ינוע לאט לעבר הפס