הערכת תנועתיות חיידקית באמצעות מכשיר מיקרופלואידי

קחו לדוגמה מכשיר מיקרופלואידי המורכב מצינור כניסה שמחובר לתא מיקרופלואידי העשוי מתעלות נקבוביות לתנועת חיידקים.

התא מחובר לתא תצפית שמחובר למשאבת מזרק דרך צינור יציאה.

הרווי את התאים עם בופר כדי להסיר בועות אוויר.

הנח את המכשיר על שלב המיקרוסקופ ומקם את עדשת האובייקטיב מעל תא התצפית.

כוון את הגדרות המיקרוסקופ כדי להמחיש בבירור תאי חיידק בודדים.

הניחו את צינור הכניסה בתוך תלייה של חיידקים מסומנים פלואורסצנטית.

התחל את הזרימה כדי למשוך חיידקים לתא המיקרופלואידי, שם הם עוברים דרך התעלות הנקבוביות כדי להגיע לתא התצפית.

תדמיין את תא התצפית במרווחים קבועים.

יצר עקומת פריצה, שמייצגת את החלק של החיידקים שעוברים דרך המטריצה הנקבובית לאורך זמן.

הסר את המיקרופלואיד מהוואקום והנח אותו על שלב המיקרוסקופ. השתמש במשאבת המזרק כדי להעשיר אותו בבופר תנועתיות.

באמצעות מיקרוסקופיית ברייטפילד או ניגודיות פאזה, כוונו את ההגדלה כדי לדמיין תאי חיידקים בודדים ולהתמקד במרכז ערוץ התצפית. העבר את הגדרות מסלול האור למיקרוסקופיה פלואורסצנטית. כוון פוקוס דרך סטייה וזמן החשיפה למצלמה כדי לפרק תאי חיידק בודדים, במקרה זה, 100 מילישניות.

לאחר מכן, הכניסו את צינור הכניסה לצינור בגודל שני מיליליטר המכיל את הטיפול החיידקי. הפוך את כיוון המשאבה והתחל למשוך את המתלים בקצב זרימה של מיקרוליטר אחד לדקה.

סרוק את חתך כל ערוץ התצפית, והקלט תמונה כל דקה.