אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 4:19 דק׳ • February 2nd, 2026
קחו צלחת תרבית שבה זחלי Caenorhabditis מאכלסים את החיידקים המעניינים המתיישבים בלומן המעי שלהם.
הצלחת מכילה זן חיידקי ידוע כמזון. להרעיב את התולעים כדי שיטרכו את כל החיידקים וייכנסו לשלב רדום.
הוסף מדיום והעבר את התולעים לצינור.
צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט.
הוסף תמיסת ניקוי, ערבב כדי להסיר חיידקים דביקים על פני השטח, השתמש בצנטריפוגה שוב, והשליך את הסופרנטנט.
חזור על השטיפה, ואז העבר את התולעים לצלחת תרבית חדשה.
אפשרו לזחילה להסיר חיידקי מזון קשורים ברפיון מהמשטח ומהלומן של המעיים, תוך שמירה על החיידקים המעניינים שמתיישבים ביציבות במעי.
חזור על שלב ההעברה והזחילה כדי להבטיח הסרה מלאה של חיידקי המזון.
הוסף את המדיום, העבר את התולעים לזכוכית שעון, ונתח כדי לחשוף את המעיים שלהן.
נתח את המעיים המכילים את החיידקים המעניינים, אסוף אותם בצינורות מלאי מים, והקפיא לשימוש עתידי.
כדי להרעיב את התולעים ולהפחתת מספר חיידקי OP50-1, יש לדגור את הנמטודות בטמפרטורה של 20 מעלות צלזיוס למשך שלושה עד ארבעה ימים. הוסיפו 5 מיליליטר של מדיום M9 לפלטת התולעים הרעבות לאחרונה, ואז העבירו את מדיום ה-M9 והתולעים לצינור צנטריפוגה סטרילי בקוטר 15 מ"מ כדי להסתובב במהירות של פי 1,000 גרם למשך 30 שניות בטמפרטורת החדר.
הסר את הסופרנטנט לפני שטיפת התולעים חמש פעמים עם 10 מיליליטר של M9 המכיל 0.05% טריטון X-100 על נוטאטור למ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים