23 בינואר 2011
וידאו זה מראה טכניקה יעילה עבור מבדל ו בניתוח שונות שקוף למחצה מבנים בגוף האדם זגוגי בעיניים פוסט מורטם.
הזגוגית היא מטריצה חוץ-תאית שקופה מבחינה אופטית הממלאת את פנים העין. ניתן לחלק אותה למספר תת-מבנים, הכוללים את ההיאלואיד הקדמי (anterior hyaloid) מאחורי העדשה, בסיס הזגוגית ברשתית הקדמית, קורטקס הזגוגית היוצר מעטפת אלסטית, וליבת הזגוגית במרכז. כדי להוציא את הזגוגית, עלינו להסיר תחילה את הסגמנט הקדמי.
להסרה של הקרנית בחיבורה ללובוס (limbus), נעזרים בלהב חד במיוחד. לאחר מכן, משתמשים במספרי קרנית וסקלרה כדי לחתוך את הקרנית ממש מקדימה ללובוס. את הקשתית מנתחים באמצעות מספריים מעוקלים על ידי משיכתה מהפנים שלה.
לחץ עדין על הגלגל יכול להוציא את הגרעין. כדי להסיר את ליבת הזגוגית, השתמש במחט בכיל 23 על מזרק של 5 cc ושאב את הזגוגית, שהיא נוזלית ברובה. ההיאלואיד הקדמי הופך לנראה כמבנה של קרום שקוף ודק שניתן לתפוס בעזרת פינצטה.
זהו מבנה אלסטי הנמצא מיד מאחורי העדשה. המעגל הפנימי הוא רצועת וייס (Wit's ligament). משתמשים במספרי ואן כדי לחתוך את הגוף הזגוגי בעוד שפינצטה מפעילה מתיחה.
ניתן להעביר את רקמת ה-Lat למבחנה מסוג afu ולחזור על הפעולה עד שכל הרקמה תפורק. כדי לגשת למבני הזכוכית הנותרים, יש לפתוח את העין באמצעות מספרי westcott מעוקלים. כל אחד מהשסעים מופנה הצידה בעזרת פינצטה בתוך צלחת פטרי.
תמונה זו מציגה את האנטומיה של בסיס הזגוגית (vitreous base), רקמה דקה ושקופה המשתרעת מעל ה-ora serrata. ה-ora serrata היא קו ההפרדה בין הגוף הריסני (ciliary body) מקדימה לבין הרשתית (retina) מאחור. בניגוד לחלקים אחרים של הזגוגית, בסיס הזגוגית דבוק היטב לגוף הריסני ולרשתית שמתחתיו, ומשיכה באמצעות פינצטה תגרום למעשה להרמה של הרקמה.
כדי לבודד את בסיס הזגוגית (vitreous base), נסיר תחילה את ה-pars plana באמצעות פינצטה ומספרי וסקוט (westcott scissors). ה-pars plana היא האזור הקטן הזה בעל הרכסים. לאחר מכן, כדי לבודד את בסיס הזגוגית, גזרו שני עד שלושה מילימטרים אחוריים לאורה (ora) באמצעות מספרי וסקוט תוך כדי ייצוב העין בעזרת פינצטה; אחזו והפעילו מתיחה על בסיס הזגוגית באמצעות פינצטה וגזרו באופן רצף בעזרת מספרי וסקוט.
מופיע מראה של שורה של פנינים בעת כריתת בסיס הזגוגית, וניתן להבחין כיצד מטריצה חוץ-תאית זו עשויה להפריד חלבונים לתאים. ניתן להשתמש בטכניקות שונות כדי לנתח את קליפת הזגוגית. מגע עם ספוג תאי WEX ירים את הקורטקס.
ניתן למצוא קצה של הקורטקס בין העליים כפי שמוצג כאן. שוב, השתמשו בפינצטה כדי ליצור מתיחה והשתמשו במספרי VanNess כדי לגזור את הקורטקס הוויטריאלי באופן רצפי. ניתן גם להרים את הקורטקס מהדיסק, ובשלב זה נעשה שימוש במספרי Westcot גדולים יותר כדי לדסק את הקורטקס בעת קילופו בזהירות מפני שטח הרשתית.
ניתן להעביר את הדגימות למיקרו-צנור ואחסננן לצורך אנליזה פרוטאומיקה מאוחרת.
סרטון זה מדגים טכניקה לבידול ולניתוח של המבנים החצירים של הגוף הזגוגית בעין אנושית לאחר המוות. התהליך כולל ניתוח קפדני כדי לחשוף תתי-מבנים שונים בתוך הזגוגית.
דיסקציה מדויקת וחלוקה למדורים של תת-מבנים בגוף הזجاجית האנושית מאפשרות פרופיל פרוטאומי הקריטי להבנת מנגנוני מחלה בהפרעות רטינליות וויטרו-רטינליות. תהליך עבודה זה תומך בזיהוי ובתיקוף של מטרות בשלבים מוקדמים על ידי חשיפת חתימות חלבון ייחודיות בתוך מדורים נפרדים של המטריצה החוץ-תאית. גישה זו מגבירה את הביטחון החיזוי עבור מחקר תרגומי ומיון פורטפוליו בתחום גילוי תרופות אופתלמולוגיות.
תהליך העבודה של נתיחה ופרוטאומיקה זה מגשר בין גילויים מוקדמים למחקר תרגומי, על ידי מתן אפשרות לניתוח מולקולרי ספציפי למדורים של הגוף הזגוגית האנושי.