אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 5:02 דק׳ • August 31st, 2026
התחילו עם מאגר המכיל נוזל אלנטואיס (allantoic fluid) שהופק מביצי תרנגולת נגועות בנגיף.
נוזל זה מכיל חלקי וירוס יחד עם מזהמים שמקורם במארח.
העבירו את הנוזל דרך מסנן עומק כדי ללכוד מזהמים גדולים, תוך כדי מתן אפשרות למזהמים קטנים יותר ול প্রচুর וירוסים לעבור.
לאחר מכן, העמיסו את הנוזל המסונן למערכת סינון, שבה הוא זורם באופן משיקי על פני שטח הממברנה.
מזהמים קטנים יותר עוברים דרך הממברנה, בעוד שהנגיף נשאר ומתרכז.
טען את הווירוס המרוכז על גבי מדרג צפיפות ובצע סבוב בצנטריפוגה. הווירוס ייצור פס ברור בנקודה שבה צפיפותו תואמת לצפיפות המדרג.
אספו את הפס העשיר בנגיף לתוך קסטת דיאליזה והניחו אותה בתוך בופר. רכיבי הגרדיאנט יפעפפו החוצה, בעוד שמים מהבופר יפעפפו פנימה דרך הממברנה החדירה למחצה.
בשלב הבא, הניחו את הקסטרה בתוך תמיסה היפרטונית כדי לשאוב החוצה מים ולרכז את הנגיף המטוהר.
לצורך טהרתו של נגיף מחלת ניוקאסל (Newcastle Disease Virus או NDV), ראשית, הכינו את המערכת הניסויית שהוגדרה מראש על ידי העברת 50 milliliters של PBS דרכה.
עצרו את המשאבה כאשר נותרו בערך חמישה מיליליטרים של PBS בתוך המבחנה. לאחר מכן, חברו למערכת צינורות מסנן עומק (depth filter) עם דירוג רטנציה של מיקרומולר אחד עד שלושה. כדי לאוורר את המסנן, הסירו את הפקק השני בצד העליון של מסנן העומק, ואז התחילו להעביר 50 מיליטרים נוספים של PBS דרך
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים