בידוד וירוסים אנדוגניים מ-Drosophila פראית באמצעות שורות תאים הנדסית חדירות
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 1:32 דק׳ • October 29th, 2026
התחילו עם מבחנה המכילה זבובים בוגרים מהמין Drosophila, מאותו מין ומאותו סוג, תחת הרדמה.
הוסיפו בופר ובצעו הומוגניזציה כדי לשחרר אוכלוסיות נגיפים וחיידקים אנדוגניים.
סבב את ההומוגנאט בצנטריפוגה, ולאחר מכן העבר את הנוזל העליון (supernatant) דרך ממברנה באמצעות צנטריפוגה כדי להסיר חיידקים ופסולת.
העבירו את התסנין לפלטת בארות (multi-well plate) המכילה תרביות תאי Drosophila מהונדסים המאפשרים התרבות של נגיפי RNA, והדגרירו.
הנגיפים חודרים לתא המארח באמצעות אנדוציטוזה המתווכת על ידי קולטן.
ברגע שהם בפנים, הגנום הוויראלי משתכפל ומייצר תוצרי ביניים של RNA דו-גדילי (dsRNA) .
תאי המאחס מבטאים חלבון מדכא שנקשר ל-dsRNA, ובכך מונע את פירוקו על ידי Dicer, אנזים ההגנה של המאחס.
דבר זה מאפשר סינתזה של RNA ויראלי וייצור חלבון ויראלי, ובכך מקדם את השכפול וההגברה של הווירוס.
עומסים נגיפיים גבוהים פוגעים בצמיחת תאי המאחס וגורמים לאפקטים ציטופתיים.
סובב את הפלטה במרכזית באופן קצר.
אספו את העל-נתיך המכיל אוכלוסיות נגיפים ושמרו אותו בטמפרטורה נמוכה לצורך ניתוחים עתידיים.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים