החדרה ויראלית של גנים ללב העכבר להערכת השפעות גנים על תפקוד הלב

התחל עם עכבר מורדם המוצב בתנוחה גבהית (supine), כאשר עור החזה גולח.

חטא את העור הגזור.

השתמשו בדימות אולטרה-סאונד כדי להציג את הלב ולזהות את הדופן החיצונית של החדר השמאלי.

קחו מיקרומזרק המכיל וירוס רקומביננטי המקודד לגן בדיקה החשוד כמשפיע על תפקוד הלב.

תחת הנחיית אולטרסאונד, הכניסו את המחט לדופן הפרוקטוריה (ventricular wall).

הזריקו את הווירוס לשכבת השריר של הדופן.

בצעו הזרקה שנייה ושלישית, המכוונות לאתרים שונים בחדר, כדי להשיג ביטוי גנים רחב יותר.

הוצא את המחט ואפשר לעכבר להתאושש.

הנגיף נקשר לקולטנים על תאי שריר החדרים, ובכך הוא מתחיל אנדוציטוזה מתווכת-קולטנים והובלה של הגנום הנגיפי אל הגרעין.

ביטוי הגנום הוויראלי מוביל לסינתזה של החלבון המקודד.

מודל העכבר מוכן כעת להערכת ההשפעות של ביטוי גנים המושרה על ידי וירוס על תפקוד הלב.

לעתחילתו, יש לעקר את אזור החזה השמאלי התחתון של העכבר המורדם באמצעות סבבים לסירוגין של קרצוף המבוסס על יוד או כלורהקסידין, ולאחריו אלכוהול, שלוש פעמים בתנועה סיבובית. תחת הנחיה של דימות אולטרסאונד, יש להחדיר את מחט המזרק המכילה את הנגיף אל תוך חזה החיה.

הקרב את קצה המחט אל הדופן החופשית הקדמית של החדר השמאלי והזרק לאט 10 עד 15 μL מהנגיף. ודא את הצלחת ההזרקה בתמונות האולטרסאונד על ידי בהירות מוגברת סביב קצה המחט. הוצא את המחט מהלב והחדר אותה לאזורים אחרים של החדר השמאלי להזרקה שנייה ושלישית של אותה כמות נגיף.