בידוד וטיהור של נגיפים מגופי חרקים נגועים

קחו גופי חרקים נגועים בנגיף התלויים בבופר המכיל חומר קלטינג.

בצעו הומוגניזציה כדי לפרק את רקמות החרק ולשחרר רכיבים תוך-תאיים, כולל חלקיקי נגיף ויוני מתכת ריאקטיביים.

חומר הקילציה נקשר ליוני מתכת, ובכך מונע היווצרות של מיני חמצן רהאקטיביים ומגן על חלקיקי הנגיף מפני נזק חמצוני.

ביצוע סבב אלטרה-צנטריפוגה להשקעת הנגיף והשאריות הבלתי מסיסות, ולאחר מכן השליכת הנוזל העליון.

הוסיפו באפר המכיל מלחים וחומר דטרגנט, ולאחר מכן השביו את המשקע על ידי פיפטור חוזר. הדטרגנט ממיס את השאריות העשירות בליפידים כדי לשחרר את חלקיקי הנגיף הקשורים אליהן.

בצעו סנטריפוגה כדי לשקיע את השאריות הבלתי מסיסות. אספו את העילוי המכיל את החלקיקים הוויראליים.

סננו את supernatant כדי להסיר שאריות פסולת ואספו את התסנין המכיל את הנגיף.

בצעו דיאליזה של התסנין במים בטמפרטורה נמוכה כדי להסיר את עודפי הדטרגנט ומלחים מהבופר.

החליפו את המים מעת לעת עד להשקעת החלקיקים הוויראליים. הנגיף מוכן לשימוש נוסף.

הומוגניזציה של גופים שלמים של *H. vitripennis* חיוביים לנגיף בבופר פוספט עם 0.02% DETCA באמצעות וורטקס במרווחים של כעשר שניות, עד שלא יישארו גושים גדולים של רקמה. מיצוי הנגיף יבוצע באמצעות סנטריפוגציה במהירות גבוהה (super-speed centrifugation) ב-22,000 g למשך 16 שעות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.

לאחר השלכת הנוזל העליון, אספו את המשקע המסיס