אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 3:42 דק׳ • September 30th, 2026
התחל עם תאים דמויי אפיתל אנושיים.
הבאר הראשונה מכילה תאים שלא עברו טרנספקציה, והבאר השנייה מכילה תאים שעברו טרנספקציה ב-microRNA mimic.
בתאים שעברו טרנספקציה, גדיל microRNA mimic נקשר למכלול חלבונים כדי ליצור מכלול השתקה מושרה-RNA (RNA-induced silencing complex).
הסיר את המצע והוסף את התרחיף הוויראלי.
דגרו כדי לאפשר היצמדות נגיפית.
שפכו את המצע והוסיפו מצע טרי, ולאחר מכן דגרו.
בתאים שאינם שעברו טרנספקציה, הווירוס עובר אנדוציטוזה המתווכת על ידי רספטורים וחודר לתא.
הוא משחרר את הגנום הוויראלי, אשר משתכפל ומייצר חלקיקי וירוס רבים.
בתאים שעברו טרנספקציה, קומפלקס השתיקה המושרה על ידי RNA מזהה את הגנום הוויראלי, מה שמעורר את פירוקו ומפחית את ייצור הנגיף.
וירוסים חדשים משתחררים. העבירו את המצע המכיל את הוירוס.
סבב במצנטריפוגה כדי לשקיע את השאריות ואסוף את העלייה המכילה את הווירוס.
הוסיפו את העל-נוזל (supernatant) לתאים שלא עברו טרנספקציה. הדגירו להדגרה לצורך הדבקה נגיפית.
בבארים שטופלו עם עלי-נוזל (supernatant) של תאים שלא עברו טרנספקציה נצפתה מוות תאי גבוהה יותר, בהשוואה לבארים שטופלו עם עלי-נוזל של תאים שעברו טרנספקציה ב-microRNA mimic, מה שמאשש עיכוב של השכפול הוויראלי בתיווך microRNA.
בשלב זה, זרעו את התאים הרגישים (permissive cells) בצלחת תרבית רקמה בעלת 96 בארות, כך שיהיו ב-80 עד 90% התמסכות (co
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים