אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 4:12 דק׳ • September 30th, 2026
התחילו עם אמבות שגודלו במצע הרעבה המכיל חומרים אנטימיקרוביאליים למניעת זיהום. האמבות משמשות כמארחים רגישים עבור וירוסים ענקיים.
הוסיפו תרחיף נגיפי מדולל המכיל אוכלוסייה מעורבת של שני נגיפי ענק.
הנח את צלחת התרבית בתוך שקית כדי למנוע התאיידות של המצע והדגר.
דילול הנגיפים מגדיל את הסיכוי שכל אמבה תפגוש סוג אחד בלבד של נגיף ענק.
האמבות בולעות את הנגיפים, אשר משתכפלים בתוך התא, מה שגורם לתאים הנגועים להפוך לעגולים ולהינתק, ובכך יוצרים אפקטים ציטופתים.
עקוב אחר התרבית תחת מיקרוסקופ אור כדי לאשש סימנים ציטופתים.
לאחר מכן, העבירו את הצלחת לבמה של מיקרוסקופ הפוך.
מקמו מיקרו-קפילריה על מיקרו-מניפולטור תחת מיקרוסקופ הפוך. המיקרו-קפילריה מכילה שמן מינרלי תואם ביולוגית לשאיבת תאים מבוקרת.
באמצעות המיקרו-קפילרה, שאבו בעדינות תא נגוע בודד ועגול ושחררו אותו לתוך תרבית אמבה טרייה. דגרו.
צאצאי הנגיפים שהצטברו בתוך התא המודבק משוחררים באמצעות אקסוציטוזה ומתפשטים כדי להדביק תאים שכנים, ובכך מרחיבים את אוכלוסיית הנגיף הענק הבודד.
בצעו דילול סדרתי של הדגימה הנגיפית בתוך תמיסת הרעבה בבארות שונות. זרקו 100 milliliters של תמיסת ההכנסה המעורבת לתוך שתי מיליליטרים של 10^6 Vermamoeba vermaformis המצויים בכל צלחת פטרי.
לאחר מכן, הניחו את צלחות הפטרי בשקית פלסטיק ניתנת לאטימה בטמפרטורה של 30 °C. שש שעות לאחר ההדבקה, בחנו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים