אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 3:01 דק׳ • September 30th, 2026
התחילו עם באר בדיקה המכילה תאי גידול שעברו שינוי גנטי ומבטאים אנטיגן מטרה, ובאר ביקורת עם תאי גידול שחסר בהם האנטיגן.
השתמש במקשר תאי T ביספציפי (BTE) המקודד על ידי טרנסגן ויראלי, בעל שני אתרי קישור, אחד עבור האנטיגן המטרה ואחד עבור רספטור ספציפי לתאי T.
הוסיפו את ה-BTE ותאי T לבארות והדריכו לדגירה.
בדגימת הבדיקה, ה-BTE מקשר בין תא הגידול לתא T, ומפעיל את תא ה-T לשחרור גרנולות ציטוליטיות.
פעולה זו ממיסה את תאי הגידול, ובכך משחררת אנזים תוך-תאי.
בביקורת, ה-BTE נקשר רק לתא T, ובכך מונע ליזיס של תאי הגידול.
סובב בצנטריפוגה ואסוף את העילאי.
הוסיפו סובסטרט והדגירו.
האנזים מקטליז את התסבסאט למוצר בעל גוון אדום.
הוסיפו תמיסת עצירה ומדדו את עוצמת הצבע.
עוצמה גבוהה יותר במדגם הבדיקה מאשרת את הפעילות האימונומודולטורית הספציפית למטרה של ה-BTE.
כדי להתחיל בהערכת ציטוטוקסיות תלוית-תאים המשרה על ידי BTE באמצעות שחרור LDH, בידלו תחילה תוצרי טרנסגן מופרשים המבטאים על ידי תאי מטרה שהודבקו בנגיף, ובידלו תאי אפקטור חיסוניים כפי שמתואר במאמר. לאחר מכן, זרעו תאי מטרה בלוח 96 בארות בעלת תחתית בצורת U והוסיפו דגימות כפי שמתואר במאמר. הוסיפו אימונומודולטורים שבודדו בעבר בריכוזים הרצויים לדגימות הרלוונטיות. הוסיפו תאי אפקטור חיסוניים ביחסים הרצויים והוסיפו מצע לנפח כולל של 100 µL לבאר. הדגירו למשך פרקי הזמן הרצויים ש
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים