הדבקה אינטראנזאלית בנגיף ההרפס של העכבר בעכברים להערכת תגובות חיסוניות של המארח

התחילו עם עכבר בריא, מורדם, הממוקם למתן תרופה דרך מערכת הנשימה.

ניתן הרפס-וירוס של עכברים באופן תוך-נחרי כדי להתחיל את ההדבקה.

הנגיף עובר דרך דרכי הנשימה ומגיע לריאות.

בתוך הריאות, הנגיף מדביק תאי אפיתל של הריאה ומשחרר את הנוקלאוקפסיד שלו.

הגנום הוויראלי חודר לגרעין ועובר תמלול ל-RNA ויראלי.

חיישן ציטוזולי של המארח מזהה את ה-RNA הויראלי ומפעיל מסלולי איתות המפעילים גורמי שעתוק ספציפיים. גורמים אלה מקדמים את써 ביטוי הגנים של ציטוקינים, מה שמוביל לייצור ציטוקינים אנטי-ויראליים.

לאחר ההדבקה, נתחו את העכבר שהורדם והוציאו את רקמת הריאה.

הניחו אונה אחת של הריאה לתוך מבחנה המכילה חרוזי סיליקה והוסיפו מצע גידול קר.

בצע הומוגניזציה לרקמה כדי לפרק את התאים ולשחרר רכיבים תוך-תאיים, כולל את הציטוקינים האנטי-ויראליים.

קררו את ההומוגנאט על קרח, ולאחר מכן חזרו על פעולת ההומוגניזציה כדי להבטיח פירוק מלא של הרקמה.

סבב במערך צנטריפוגה כדי לשקיע את שיירי התאים.

אסוף את supernatant המכיל ציטוקינים אנטי-ויראליים כדי להעריך את התגובה החיסונית של המארח לזיהום בהרפס-וירוס.

בצעו הדבקה תוך-אפית (intranasally) לעכברי C57-black-six שהורדמו, באמצעות 40 microliters של 40 plaque forming units של הפתוגן העכברי הטבעי gamma herpes virus 68. לאחר הקטלת העכברים בנקודות הזמן הניסוייות שלאחר ההדבקה, פתחו את בית החזה באמצעות חתך צדי