מיו מכני ניתוח בשרירי השלד מבודדת

מטרת הליך זה היא לקבוע את הכוח שנוצר ואת העייפות של שריר השלד המבודד כדרך לכמת את ההשפעות של שינוי גנטי או טיפול. ראשית, השריר הארוך ביותר של extensor digitorum מנותח מהגפה האחורית של העכבר. ואז השריר מותקן ברצועת שריר מיו.

השלב הבא הוא לברר את המתח לגירוי ויומרה של השריר בו מושג מתח עווית מקסימלי. השלב האחרון הוא לקבוע את יחס תדר הכוח עבור השריר, כמו גם את הופעת ומידת העייפות עם תדר נמוך לגירוי טאני. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות שינויים מדידים בתכונות המכניות של השריר באמצעות מיוגרפיה.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו בדיקת מאמנים, הוא שמיוגרפיה מאפשרת הערכה כמותית של חוזק ותפקוד השרירים. אימצנו לראשונה שיטה זו כאשר הבנו שיש צורך במדדים כמותיים להערכת תפקוד השרירים כאשר טיפולים חדשים מבוססי תאים וביו-הנדסה למחלות שרירים נבדקים במודלים פרה-קליניים של בעלי חיים. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הביולוגיה של השרירים וניוון שרירים, כגון האם טיפולים ספציפיים או שינויים גנטיים משנים את תפקוד השרירים.

הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית מכיוון שקשה לשלוט בשלבים הדרושים לטיפול נכון בשריר. בדרך כלל אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו מכיוון שניתוח מהיר וטראומטי של שרירי ההינדי דורש תרגול ומיומנות נרכשת. הדגמת ההליך תהיה כאשר אנו מביאים מדען מחקר ו-SAB לסטודנט לתואר שני במעבדות שלנו.

לאחר המתת חסד של עכבר, סדרו את צד הגחון של הפגר כלפי מעלה על מגש דיסקציה והצמידו את הרגל למגש תחת מיקרוסקופ דיסקציה. חותכים את העור ופותחים בזהירות את הפאשיה. לאחר מכן, קלף את שריר השוקה הקדמי מהקרסול כלפי מעלה כדי לחשוף את שריר ה-extensor digitorum longus או EDL.

השתמש בטיפות תמיסת רינגר חלב כדי לשמור על לחות השריר במהלך הקציר. לאחר מכן נתח את ה-EDL תוך שמירה על כמה שיותר גיד בכל קצה, והיזהר לא לגעת בסיבי שריר ה-EDL עצמם. הכניסו את שריר ה-EDL לצלחת פטרי המכילה תמיסת רינגר חלבי.

כעת קושרים תפרים לכל אחד מגידי השריר. מחקרים אלה משתמשים באמבט רקמות כדי להחזיק את השריר ובמתמר כוח למדידת מתח השרירים. בנוסף, ממריץ חשמלי דופק מרובע ופלטפורמת רכישת נתונים משמשים כדי להפיק תיעוד וניתוח התגובות המכניות שלי.

השלב הבא הוא למלא את אמבט השתל של מיו ב-6.5 מיליליטר של קרבס, ומכאן פתרון לווייני. מחממים את האמבטיה ל-25 מעלות צלזיוס מבעבעים את תמיסת קרבס עם 95% חמצן, 5% פחמן דו חמצני לאחר בעבוע במשך 15 דקות. השתמש בתפרים על הגידים כדי להעביר את שריר ה-EDL לאמבטיה.

אבטח את הגידים בין המהדקים של שתל המיאו. היזהר לא להדק את השריר עצמו. שמור על אמבט השתל מיו ב-25 מעלות צלזיוס.

כדי להתחיל בניתוח המתח, התאם את אורך השריר הראשוני כך שיהיה שווה לאורך שריר האינצ'י. שימוש במשך גירוי של 0.5 אלפיות השנייה. הגדל בהדרגה את המתח כדי לקבוע את הגירוי הנדרש להשגת מתח עווית מקסימלי.

לאחר מכן הגדר את הגירוי גבוה ב-20% כדי להשיג גירוי על-מקסימלי, שהוא בדרך כלל כ-40 וולט. השלב הבא הוא למתוח את השריר בהדרגה עד שלא תהיה עלייה נוספת במתח העוויתות. אורך זה נחשב לאורך השריר האופטימלי.

אפשר לשריר להתייצב במשך שלוש דקות, ואז לשמור על השריר באורכו האופטימלי. ספק גירוי ריבועי על-מקסימלי והקלט את הפלט, רשום את עקומת מתח העווית. באיור זה.

מתח העווית המקסימלי מסומן pt. זמן ההתכווצות מסומן ct. חצי זמן ההרפיה נקרא HRT.

הבר מייצג שנייה אחת לאחר מנוחה של שלוש דקות. מדוד את מתח הטיטאניק על ידי הפעלת מתח של גירויים סופר מקסימליים למשך 300 מילישניות ב-150 הרץ באורך אופטימלי. הליך זה יוצר עקומת מתח טטנוס.

המתח המקסימלי של טיטניק מסומן po. המתח הטיטניק למחצה הרפיה נקרא HRTT. הבר מייצג שנייה אחת לאחר פרק מנוחה של שלוש דקות.

התחל את ניתוח תדר הכוח על ידי הפעלת רכבות של 300 אלפיות השנייה של גירויים סופר מקסימליים בשלושים שישים ומאה, מאה וארבעים ו-160 הרץ. אפשר שלוש דקות מנוחה בין כל רכבת גירויים לאחר פרק זמן מנוחה של שלוש דקות. התחל את ניתוח העייפות על ידי הפעלת רכבות של טאי קצר 60 הרץ למשך 300 מילישניות כל שלוש שניות למשך 10 דקות על 10 דקות.

כוח הטיטאניק אמור לרדת לרמת מישור של כ-15% מהערך ההתחלתי. לאחר סיום רישומי הכוח עם השריר באורך אופטימלי, מדוד את קוטר השריר באמצעות העין במיקרוסקופ. לאחר מכן, הסר את התפרים ושקול את השריר כדי לקבוע את מסת השריר.

השלב האחרון הוא לשקול את העכבר כדי להעריך את מסת הגוף. מדידות אלה משמשות לחישובים המפורטים במאמר הנלווה. איור זה מראה את העלייה במתח שנוצר עם הגדלת תדירות הגירוי המוצגת.

הנה תגובת השריר לאימון דופק ב-30 הרץ. נתון זה מציג את הכוח הגדול יותר המבוקש ברכבת דופק של 140 הרץ. גרף זה מציג את יחס תדר הכוח המשורטט כאחוז הכוח המקסימלי לעומת תדר הגירוי.

צורת עקומת תדר הכוח אופיינית לכוח השרירים וניתן להשתמש בה כדי לבצע השוואות בין שרירים מבעלי חיים שונים. נתון זה מדגים עייפות שרירים במהלך 10 דקות של גירוי בתדר נמוך. נתונים אלה מראים את תגובת השריר לרכבת הגירוי בנקודות הזמן שצוינו.

תרשים זה מציג את עייפות השרירים בתדירות נמוכה כפלוס של אחוז כוח מקסימלי לעומת זמן. צורת עקומת העייפות בתדר נמוך אופיינית לחוזק השרירים וניתן להשתמש בה כדי לבצע השוואות בין שרירים מבעלי חיים שונים. לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 30 דקות בעקבות הליך זה.

ניתן לבצע שיטות אחרות כמו אימונוהיסטוכימיה, כתם מערבי ו-PCR כמותי על מנת לענות על שאלות נוספות כמו האם וללבוש חלבונים מיוגניים ספציפיים וסמני תאי גזע באים לידי ביטוי בשריר המטופל בזמן ניסיון הליך זה. חשוב לזכור שכל הציוד שלך יהיה מוכן כדי למזער את הזמן בין קצירת השרירים לניתוח. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לנתח את הגפה האחורית של השריר, להרכיב את השריר ברצועת שריר מיו, כמו זה שהראינו לך מטכנולוגיית myo הדנית ולמדוד שינויים בתכונות המכניות שלי.