אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 2:48 דק׳ • July 8th, 2025
ביופסיות מונחות קולונוסקופיה במודלים של עכברים גורמות לאתרי פצע במעי הגס. מיטות פצעים אלו מבודדות למחקרים מולקולריים והיסטולוגיים כדי להבין את תהליך ריפוי הפצעים במחלות דלקתיות של מערכת העיכול, או מערכת העיכול.
כדי להתחיל בבידוד מיטת הפצע, הנח עכבר ניסוי שעבר המתת חסד עם פצע קולונוסקופי במצב שכיבה. חתכו את עור הבטן והשרירים הבסיסיים כדי לחשוף את חלל הגוף.
הניחו מספריים סגורים מתחת למעי הגס והרימו אותם. חותכים את המעי הגס בנקודת האמצע שלו, ובפי הטבעת כדי להפריד אותו מהגוף. שטפו את המעי הגס עם חוצץ מתאים כדי להסיר תוכן צואה.
הנח את המעי הגס על נייר סינון וחתוך אותו לאורך, כשהצד המזנטרי פונה כלפי מטה על נייר הסינון. כעת, הוסיפו צבע כחול מתילן מעל המעי הגס והתבוננו במיקרוסקופ.
הצבע מכתים את הרקמה המתה והגרגירית במצע הפצע, מה שגורם לה להיראות כהה יותר מהרקמה הבריאה שמסביב, מה שמאפשר זיהוי קל שלה. שמור על מצע הפצע המבודד למחקרי ביטוי גנים.
בנקודת הסיום הניסוי המתאימה, פתחו את שכבות העור ושרירי הבטן כדי לחשוף את חלל הגוף של חיית הניסוי, והניחו מלקחיים סגורים מתחת למעי הגס. הרם בעדינות את המעי הגס כדי לשחרר אותו מהמזנטריה הבסיסית, וחתוך את הרקמה בנקודת האמצע שלה ובפי הטבעת כדי לאסוף אותה מהעכבר.
השתמש במזרק של 20 מיליליטר מלא ב-PBS קר כקרח, ומצויד במחט גבאז' של חולדות, כדי לשטוף את תכולת הצואה; והנח את המעי הגס הנקי על פיסת נייר פילטר. פתח את המעי הגס לאורך, וודא שהצד המזנטרי פונה כלפי מטה כנגד נייר המסנן, והשתמש בפיפטה של פסטר כדי לכסות את הרירית ב-0.2% מתילן כחול.
לאחר מספר שניות, יש לנקז את הכתם העודף ולראות את המעי הגס תחת מיקרוסקופ מנתח כדי לאתר את מיטת הפצע. השתמש במספריים מיקרו קשתית בגודל 4 אינץ 'כדי לחתוך סביב קצה המיטה, היזהר לא לחתוך לשכבת השריר, והשתמש בפינצטה עדינה כדי להעביר את הרקמה המנותחת לצינור להקפאה ו / או אחסון בהצמדה.