אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 5:05 דק׳ • July 8th, 2025
מקרופאגים צפקיים, השוכנים בחלל הצפק, בולעים פתוגנים ומפרישים ציטוקינים פרו-דלקתיים ואנטי דלקתיים כדי לווסת את התגובה החיסונית.
כדי לחקור הפעלה in vivo של מקרופאגים צפקיים, התחל בריסון העכבר כדי למזער את תנועתו. קח תערובת של ליפופוליסכרידים - אנטיגנים שמקורם בפתוגן ואימונוגלובולינים תוך ורידיים והזריק אותם תוך צפק.
לאחר ההזרקה, ליפופוליסכרידים נקשרים לקולטני זיהוי הדפוסים של המקרופאגים, מעוררים תגובה חיסונית ומשחררים ציטוקינים פרו-דלקתיים, כולל IL-12.
לעומת זאת, אימונוגלובולינים מקיימים אינטראקציה עם קולטני Fc של מקרופאגים, מווסתים את התגובה החיסונית על ידי דיכוי ייצור IL-12 וקידום שחרור ציטוקינים אנטי דלקתיים, כולל IL-10. גירוי משותף זה על ידי ליפופוליסכרידים ואימונוגלובולינים מפעיל מקרופאגים צפקיים למקרופאגים אנטי דלקתיים.
אבטח את העכבר שהורדם ובצע חתך אורכי לאורך חלל הבטן. החזר את העור משריר הבטן. להזריק חיץ לחלל הצפק; לערבב כדי לעקור תאים מחלל הצפק.
אסוף את נוזל הצפק המופעל המכיל מקרופאגים.
תרבית מקרופאגים מופעלים אלה במדיום המכיל מולקולות קו-גירוי - אימונוגלובולינים וליפופוליסכרידים כדי לאפשר ייצור ציטוקינים. אסוף את המדיום המושקע וכימת את רמות הציטוקינים באמצעות בדיקת אימונוסורבנט מקושר לאנזים.
ריכוז IL-10 גבוה יותר מ-IL-12 מאשר הפעלה מוצלחת של מקרופאגים אנטי דלקתיים צפקיים.
ה
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים