אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:41 דק׳ • July 8th, 2025
הפעלת תאי B כרוכה בזיהוי אנטיגנים על ידי קולטני תאי B, BCRs, על פני השטח שלהם כדי לעורר תגובה חיסונית.
כדי לחקור את הפעלת תאי B במבחנה, התחל עם כיסוי המכיל אנטיגנים ונוגדנים נגד CD45R, משותק על חומר פולימרי. האנטיגנים והנוגדנים הטעונים שלילית מקיימים אינטראקציה עם פולימרים טעונים חיובית על הכיסוי באמצעות אינטראקציות אלקטרוסטטיות.
מכסים את הכיסויים המצופים במדיום המכיל תאי B ודוגרים. ה-CD45R - החלבון הטרנסממברני של תאי B - מקיים אינטראקציה עם הנוגדנים המשותקים, ומקל על הידבקות התאים.
ה-BCRs על תא B המודבק מקיימים אינטראקציה עם אנטיגן, ויוצרים סינפסה חיסונית - אזור התיאום לאיתות תאים והפנמת אנטיגן. זה מקדם עיצוב מחדש של שלד התא ויוזם התפשטות תאים, מה שמגדיל את פני התא במגע עם האנטיגנים.
שיפוץ נוסף גורם לתנועה של אנטיגנים המחוברים ל-BCR לעבר מרכז הסינפסה החיסונית. סידור מחדש תאי זה גורם למיקום מחדש של הצנטרוזום ליד הממברנה הסינפטית המנחה אברונים תוך-תאיים, כולל ליזוזומים, לעבר הסינפסה.
היתוך הליזוזומים עם הממברנה מוביל להפנמת מתחמי האנטיגן-BCR. האנטיגנים המופנמים מעובדים לשברי פפטיד, נטענים על קומפלקס תאימות היסטולוגית עיקרי מסוג II או מולקולות MHC, ולבסוף מוצגים על תאי B פעילים.
הכן את תמיסת האנטיגן על ידי הוספת אנטי-BCR ו-B220 ב-PBS לריכוז סופי של 10 מיקרוגרם למ"ל ו-7.5 מיקרוגרם למ"
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים