אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:50 דק׳ • July 8th, 2025
נתרן דקסטרן סולפט, או DSS, גורם לקוליטיס - מחלת מעי דלקתית - שבה הפרעה במחסום האפיתל של המעי מובילה לדלקת.
כדי להעריך נזק לרקמות, קח רקמת מעי גס קבועה שבודדה ממודל עכברי של קוליטיס הנגרמת על ידי DSS. טבלו את הרקמה במדיום הטבעה לחיתוך קל, והקפיאו במהירות.
בעזרת מיקרוטום קריו, השג קטע רקמה דק ואסוף אותו על מגלשת זכוכית.
טבלו את השקופית בתמיסה המכילה צבע המטוקסילין מחומצן הקשור למורדנט - קטיון מתכת - המקנה מטען חיובי לצבע. קומפלקס הצבע נקשר ל-DNA בעל מטען שלילי, ומכתים את הגרעין בצבע סגול-אדמדם.
טבלו את הרקמה בתמיסת חומצה-אלכוהול מבדילה, והסירו צבע שאינו קשור במיוחד מהציטופלזמה ומהמטריצה החוץ-תאית. שטפו את הרקמה בחומר מכחלחל - מדיום אלקליין - המקנה צבע כחול לגרעינים, ומגביר את הניגודיות.
טבלו את המגלשה בריכוזי אלכוהול הולכים וגדלים כדי לייבש את הרקמה ולשפר את חדירת הכתמים הנגדיים.
טבלו את הרקמה בכתם הנגדי - תמיסת אאוזין חומצית - המעניקה צבע ורוד לחלבונים הציטופלזמיים הבסיסיים ולמטריצה החוץ-תאית. שטפו את השקופית באלכוהול כדי להסיר עודפי אאוזין. טבלו את הרקמה בקסילן כדי להפוך את הרקמה לשקופה - לבדיקה מיקרוסקופית טובה יותר.
תחת מיקרוסקופ, החלק של המעי הגס מראה נזק מחמיר לרקמות, המעיד על קוליטיס הנגרמת על ידי DSS.
לצביעת המטוקסילין ואאוזין של רקמת המעי הגס המבודדת, למחרת בבוקר, טבלו את חת
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים