מערכת תרבית איברי מעיים Ex Vivo לחקר אינטראקציות מיקרוביוטה מארחת

כדי לחקור את האינטראקציות בין המארח למיקרוביוטת המעיים ex vivo, התחל עם רקמת מעי גס של עכברים נקייה מחיידקים ספציפיים המתיישבים במעיים. יש לשטוף את הרקמה במדיום להסרת הצואה ולהעביר לצלחת מרובת בארות המכילה מדיום מתאים.

במקביל, הרכיבו את מכשיר תרבית איברי המעיים הרב-באר, ex vivo.

כל באר של המכשיר מורכבת משתי יציאות קלט ופלט זוגיות - הראשונה מתחברת ללומן המעי הגס והשנייה מספקת אספקה רציפה של מדיום לבארות כדי לשמור על כדאיות הרקמות.

העבירו את הרקמה למכשיר. חבר את הקצוות הפרוקסימליים והדיסטליים של המעי הגס לזוג יציאות הקלט והפלט הראשון. התחל את זרימת הממריץ הלומינלי ללומן המעי הגס וזרימה בינונית לבאר.

החומר הממריץ מכיל חיידקים המתיישבים במעיים המפרישים אנזימים מפרקי שכבת ריר, ומאפשרים להם להיצמד לתאי האפיתל הבסיסיים. זה מפעיל מפל איתות שמפעיל תאים דנדריטיים מקומיים להרחיב את הדנדריטים שלהם בין תאי האפיתל, ללכוד אנטיגנים חיידקיים וליצור תגובות חיסוניות ספציפיות.

כתוצאה מכך, תאי CD4+ T נאיביים מתמיינים לתאי Th17.

תאי Th17 מייצרים ציטוקינים מעודדי דלקת המפעילים תאים חיסוניים אחרים כדי להילחם בפתוגנים הפולשים ולשמור על שלמות מחסום המעי.

כדי להתחיל, הכנס את המחטים הקהות למיקום המתאים בתוך תבנית המכשיר ויצוק כ-20 גרם של תערובת פולידימתילסילוקסן או PDMS עבור סט אחד של המכשיר והמכסה. הנח את הת