אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:36 דק׳ • July 8th, 2025
כדי לחקור את התגובה החיסונית של דרוזופילה כנגד חיידקים פתוגניים, קח השעיה של פתוגנים חיידקיים ברי קיימא. טובלים מחט סטרילית במתלה ואוספים כמות קטנה.
הניחו זבוב מורדם מתחת למיקרוסקופ דיסקציה. בעזרת המחט הנגועה, דוקרים את הזבוב בצלחת הסטרנופלאורלית של בית החזה. הדקירה מכניסה חיידקים לתוך המולימפה - נוזל מחזור הדם בחלל הגוף.
הניחו את הזבובים הנגועים בתוך בקבוקון המכיל מזון זבובים, ושמרו עליהם לתקופה מספקת.
החיידקים מנצלים את המולימפה כמקור עשיר לחומרים מזינים ומתרבים - וכתוצאה מכך זיהום מערכתי. המולימפה מכילה המוציטים, תאי אפקטור חיסוניים במחזור הדם.
המולימפה קשורה גם לגוף השומן, רקמה מיוחדת לאחסון אנרגיה. קולטני זיהוי הדפוסים על תאי גוף השומן מקיימים אינטראקציה עם החיידקים. אינטראקציה זו גורמת לתאים להפריש פפטידים אנטי-מיקרוביאליים, המתווכים הרג חיידקים.
ההמוציטים המסתובבים מקיימים אינטראקציה עם החיידקים באמצעות קולטנים פגוציטים, מה שגורם לבליעתם לתוך פגוזומים וכתוצאה מכך לפירוק חיידקים.
תת-קבוצה של הפתוגנים מתחמקת מהתגובה החיסונית של המארח, מה שמוביל למוות של הזבובים.
עקוב אחר תמותת הזבובים ובצע בדיקות במורד הזרם כדי להעריך את התגובה החיסונית נגד הפתוגן.
להכנת העט המזהם, ממיסים את קצה קצה המיקרופיפטה של 200 מיקרוליטר ומכניסים סיכת חרקים בגודל 0.15 מילימטר לפלסטיק המותך. הניחו לפלסטיק להתמצק כך שהסיכה תוחזק במקומה עם 0.5 סנטימטרים של סיכה הנמשכת מהפלסטיק.
הרדמת זבובים עם פחמן דו חמצני, ודקר את הזבובים בצלחת הצדר החזה של בית החזה עם המחט תוך הימנעות מאתרי ההצמדה של הכנפיים והרגליים. הסר את הזבובים מסיכת הזעיר באמצעות מלקחיים רכים. הקפידו לטבול את הסיכה בתרחיף החיידקים בין דקירת כל זבוב.
מניחים את הזבובים הדוקרים לקובץ טרי עם מדיום זבוב חדש ומניחים את הבקבוקון על צדו עד שכל הזבובים מתאוששים מההרדמה.