טכניקה להערכת התגובה החיסונית נגד אנטיגן על ידי גרימת דלקת בעור

קחו עכבר מורדם עם אוזניים מפורקות, ומרחו את אנטיגן הבדיקה - הפטן מעורבב בתמיסת רכב מתאימה - על העור החשוף. תמיסת הרכב מאפשרת חדירה מהירה דרך שכבת האפידרמיס החיצונית ביותר כדי להגיע לדרמיס הבסיסי.

הפטן נקשר לחלבוני העור, ויוצר אימונוגן המזוהה על ידי תאים מציגי אנטיגן או APCs. עם הבליעה, APCs מעבדים ומציגים את האימונוגן על פני השטח שלהם.

APCs נודדים לבלוטות הלימפה, מציגים את האימונוגן לתאי T נאיביים ומפעילים אותם. תאים מופעלים מתמיינים לתאי זיכרון T מוקדמים - תת-קבוצה שלהם נודדת לעור.

עם חשיפה חוזרת, APCs מציגים את האימונוגן לתאי ה-T המוכנים, וגורמים לשחרור ציטוקינים פרו-דלקתיים.

ציטוקינים מפעילים קרטינוציטים ותאי פיטום לשחרר כימוקינים, הנקשרים לנויטרופילים במחזור הדם, מה שמקל על האקסטרוואזציה שלהם. הנויטרופילים המוגזמים מגיעים לאתר הדלקת.

ציטוקינים מפעילים נויטרופילים כדי לייצר אנזימים פרוטאוליטיים ומיני חמצן תגובתיים - הגורמים לנזק לרקמות ומגבירים את הדלקת.

כדי להתחיל, יש להרדים את העכבר בזריקה תוך-צפקית של קוקטייל הרדמה, ולאשר טשטוש הולם בבדיקת צביטה בבוהן. לאחר מכן, מרחו קרם להסרת שיער על משטח הגב של שתי האוזניים. נגב אותו תוך דקה ושטוף את העור במים.

מדוד את עובי האוזן שבה בוצעו היישומים באמצעות מיקרומטר. מאוחר יותר, החזירו את העכבר לכלוב משלו לאחר שהתאושש מההרדמה, ואפשרו לעכבר לנוח לפחות שלושה ימים לפני בדיקה נוספת.

לאחר שלושה ימים יש להרדים מחדש את העכבר ולמדוד שוב את עובי האוזן כדי לוודא שהוא אינו מגורה. לאחר מכן, יש למרוח 12.5 מיקרוליטר של 1.25% אוקסזולון על כל צד של האוזן הימנית, ולמרוח 12.5 מיקרוליטר מתמיסת הרכב אצטון-שמן זית על כל צד של האוזן השמאלית.

כמו תמיד, צפו בעכבר מתאושש מההרדמה. 24 שעות לאחר מכן, מדדו שוב את עובי האוזן בהרדמה, כדי לוודא שהתרחשה דלקת עור הנגרמת על ידי אוקסזולון.