אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:00 דק׳ • July 8th, 2025
קח צלחת מרובת בארות עם תאי גזע מזנכימליים, או MSCs, בבארות נבחרות.
הכנסת מקרופאגים ודגירה, מה שמקל על אינטראקציה בין MSC למקרופאגים בבארות התרבות המשותפת.
הוסף זימוזאן - רכיב דופן תא שמרים - מצומד לפלואורופור רגיש ל-pH לכל הבארות.
קולטני נבלות מקרופאגים נקשרים לזימוזן, ומפעילים את בליעתו בתוך פגוזום, שמתמזג עם ליזוזום ליצירת פגוליזוזום.
pH חומצי בתוך הפגוליזוזום גורם לפלואורופור לפלוט פלואורסצנטיות.
בבארות התרבית המשותפת, MSCs מקרינים ננו-צינורות מנהור, או TNT, הרחבות ציטופלזמיות המגשרות עם מקרופאגים. מיטוכונדריה של MSC עוברת דרך TNT כדי להיכנס למקרופאגים, מה שמגדיל את המספר הכולל של מיטוכונדריה תפקודית.
מספר מיטוכונדריאלי מוגבר מגביר את הייצור של אדנוזין טריפוספט או ATP, מה שמתדלק את דרישת האנרגיה לעלייה בפגוציטוזיס.
רשום את עוצמת הקרינה לאורך זמן מהזימוזנים המצומדים לפלואורופור המופנמים.
תרבית משותפת מראה פלואורסצנטיות מוגברת בהשוואה לבארות עם מקרופאגים בלבד, מה שמעיד על שיפור בתיווך MSC של פגוציטוזיס מקרופאגים.
שאפו בעדינות את המדיום מבארות הניסוי המכילות תאי גזע מזנכימליים. השתמש במיקרו-פיפטה רב-ערוצית כדי להוסיף 100 מיקרוליטר של תרחיפי תאי המקרופאג המטופלים והבקרה בבארות הניסוי המתאימות בהתאם לתכנון הצלחת, ודגירה למשך הלילה כפי שהודגם. הוסף מיליליטר אחד של מדיום הדמיה של תאים
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים