אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:41 דק׳ • July 8th, 2025
הנח עכבר מורדם על כרית הניתוח הסטרילית המחוברת ליחידת נשימה עם זרימה רציפה של חמצן וגז הרדמה.
בעזרת פילטר, טען את המזרק באוויר סטרילי. חבר מחט למזרק והזריק אוויר מעוקר תת עורי לחלק האחורי של העכבר כדי ליצור שקית אוויר בתוך שכבות הרקמה. עקוב אחר העכבר עד להתאוששות.
יש להרדים מחדש את העכבר ולתת ליפופוליסכריד, LPS, לתוך כיס האוויר. LPS נקשר לקולטן דמוי טול 4, TLR-4 על המקרופאגים שוכני הרקמה והתאים הדנדריטים, ומפעיל אותם.
התאים המופעלים משחררים מתווכים דלקתיים שונים כמו ציטוקינים וכימוקינים, המושכים נויטרופילים ותאי חיסון אחרים. מתווכים אלה גם מגבירים את חדירות כלי הדם הסמוכים, ומאפשרים לתאי חיסון ולגורמים מסיסים להיכנס לכיס האוויר מזרם הדם.
כאשר נוזל מצטבר בתוך השקית, הוא יוצר הפרשה המורכבת מתאים דלקתיים ומולקולות ביו-אקטיביות שונות.
המתת חסד של העכבר והזרקת מאגר כביסה מתאים לתוך שקית האוויר. אוספים את ההפרשה הדלקתית לתוך צינור מיקרו-צנטריפוגה וצנטריפוגה. השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את התאים במאגר הכביסה.
נתח את ההפרשה הדלקתית כדי לכמת את יחס הנויטרופילים ולקבוע את מידת החדירה שלהם.
לאחר הרדמת העכברים ביום האפס, השתמש בפילטר של 0.22 מיקרון המחובר למזרק של חמישה מיליליטר כדי להשיג נפח של שלושה מיליליטר של אוויר מעוקר. הרם את העור האחורי של העכבר המורדם בעזרת פינצטה והשתמש תת עורית ב
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים