JoVE Encyclopedia of Experiments
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:29 דק' • July 8th, 2025
כדי ליצור מודל עכבר דלקת מפרקים המושרה על ידי אדג'ובנט, התחל עם עכבר מורדם במצב שכיבה.
קח מזרק המכיל אדג'ובנט מלא של פרוינד או CFA, תרחיף של Mycobacterium tuberculosis מומת בחום בשמן. הזריק את ה-CFA לחלל מפרק הקרסול - אזור מלא בנוזל סינוביאלי בין עצם הרגל התחתונה לעצם כף הרגל - ולאחר מכן הזרקה לרקמה המקיפה את המפרק, תוך גרימת דלקת כרונית.
החלל המלא בנוזל גובל בקרום סינוביאלי, המורכב משכבת רירית מועשרת במקרופאגים ופיברובלסטים - המתפקדים כמחסום חיסוני - ורקמת ביניים תת-רירית.
המקרופאגים מזהים את האנטיגן החיידקי והופכים לפנוטיפ פגוציטי, המשבש את שלמות המחסום. המקרופאגים גם משחררים חומרים כימיים וציטוקינים. החומרים הכימואטרקטיביים המשוחררים מתווכים את גיוס הנויטרופילים במחזור הדם לאתר ההדבקה.
זיהוי האנטיגן החיידקי מפעיל נויטרופילים, וכתוצאה מכך דה-גרנולציה. מטריצות מתכת ופרוטאזות משוחררות גורמות לנזק לסחוס ולדלקת מתמשכת.
ציטוקינים המופרשים על ידי מקרופאגים נקשרים גם לקולטנים על הפיברובלסטים הסינוביאליים. קשירת הציטוקינים וזיהוי האנטיגן גורמים להפעלת פיברובלסטים.
פיברובלסטים מופעלים עוברים התפשטות חריגה, וכתוצאה מכך היפרפלזיה סינוביאלית - מה שמוביל לייצור עודף של נוזל סינוביאלי ונפיחות במפרקים, האופיינית לדלקת פרקים.
השהה את האדג'ובנט של פרוינד על ידי מערבולת של חמש שניות לפחות. לאחר מכן, שאב 100 מיקרוליטר של תרחיף למזרק אינסולין.
לאחר ההרדמה, סמנו את הכפה שנבחרה והזריקו 20 מיקרוליטר של אדג'ובנט פרוינד שלם מהמזרק לארבעה נקודות פרי-ארטיקולריות בחלל מפרק הקרסול. הכניסו את העכברים המעובדים לתא חדש. עקוב אחר העכברים כדי לוודא שהם נושמים עד שהם יחזרו ליכולת התנועה. כל שלושה ימים, השתמש במד עובי כיס כדי למדוד את קוטר מפרק הקרסול.
כמו כן, העריכו את חומרת דלקת המפרקים על ידי קריטריון ניקוד דלקת פרקים. אפס זה נורמלי. אין עדות לאריתמה ונפיחות.
אחד מהם הוא דלקת המפרקים הקלה ביותר. אריתמה ונפיחות קלה המוגבלת לטרסל או למפרק הקרסול. השני הוא דלקת מפרקים בינונית. אריתמה ונפיחות קלה המשתרעת מהקרסול ועד הטרסלים. השלישי הוא דלקת מפרקים חמורה. אריתמה ונפיחות בינונית המשתרעת מהקרסול למפרקי המטטרסל. ארבע היא דלקת המפרקים החמורה ביותר. אריתמה ונפיחות חמורה מקיפות את הקרסול, כף הרגל והאצבעות, או אנקילוזיס של הגפה.