כימות עומס הליקובקטר פילורי בקיבת עכבר נגוע

כדי לכמת את קולוניזציה של הליקובקטר פילורי בקיבה נגועה, התחל ברקמת הקיבה השטוחה המכילה את אזורי הגוף והאנטרום, תלויה במדיה מזינה כדי לתמוך בכדאיות החיידקים.

הומוגניזציה כדי לפרק את רקמת הקיבה עם שכבת הריר, ולשחרר הליקובקטר פילורי מהרקמה למדיה. בצע דילולים סדרתיים של הומוגנאט הקיבה שנוצר באמצעות מדיה.

השג אגר דם סוסים מיובש, HBA, צלחות, המחולקות למספר מקטעים. צלחות HBA מתווספות בתערובת של אנטיביוטיקה. מעבירים כל דילול הומוגני לקטעים נפרדים של הצלחת ומורחים אותו באופן שווה.

לאחר הייבוש, מקם את הלוחות במצב הפוך בתוך צנצנת תרבית אנאירובית לחה עם תערובות גז מיוחדות. דגירה.

הסביבה המיקרואירופילית שמספקת צנצנת התרבית האנאירובית בשילוב עם חומרי ההזנה HBA מסייעת להליקובקטר פילורי לגדול וליצור מושבות. האנטיביוטיקה ב-HBA מעכבת את הצמיחה של מיני חיידקים ממיקרוביוטת הקיבה האנדוגנית.

ספור מושבות הליקובקטר פילורי על מקטעי צלחת HBA הנופלים בטווח ספציפי הניתן למנייה.

חשב את עומס הליקובקטר פילורי ברקמת הקיבה, המציין את מידת ההתיישבות החיידקית בתוך הרקמה.

כדי לספור את מספר ההליקובקטר פילורי הבר-קיימא בקיבה לאחר ההדבקה, יש לבצע הומוגניזציה של דגימות הקיבה המאוחסנות ב-BHI, ולבצע דילול סדרתי כפול של ההומוגנטים בקיבה שנוצרו בציר סטרילי טרי.

חלקו אגר דם סוסים מיובש מראש, או צלחות HBA, בתוספת אנטיביוטיקה נוספת לשלושה או ארבעה מקטעים, ובעזרת התאמה של טכניקת מיילס ומיסרה, הוסיפו 10 עד 100 מיקרוליטר מכל דילול הומוגני בקיבה על מקטע של כל צלחת אגר. מורחים את ההומוגנטים בלולאות פלסטיק סטריליות ומניחים לצלחות להתייבש. לאחר מכן, הניחו את הצלחות במצב הפוך בצנצנות גז אנאירוביות המכילות צלחת פטרי מים וחבילת גז, ולאחר מכן, דגרו את הצנצנות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך ארבעה עד שבעה ימים.

כאשר ניתן לצפות במושבות, ספרו את המקטעים המכילים בין 10 ל-100 מושבות מבודדות.