אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:49 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם צלחת מרובת בארות המכילה תאים חד-גרעיניים מדם היקפי אנושי, או PBMCs שמקורם בנגיף כשל חיסוני אנושי, או תורם נגוע ב-HIV.
PBMCs מכילים תאים חיסוניים שונים, כולל תאי T חיוביים ל-CD4 נגועים ב-HIV עם DNA פרו-ויראלי משולב.
זרעו את הבארות בתערובת של אריתרוציטים טפילים של פלסמודיום פלציפרום, או PfRBCs - המבטאים אנטיגנים שמקורם בטפילים, ו-RBCs לא נגועים.
במהלך הדגירה, האנטיגנים של ה-PfRBCs מקיימים אינטראקציה עם קולטנים של תאי חיסון, מפעילים אותם ומשחררים ציטוקינים.
ציטוקינים אלה מפעילים איתות במורד הזרם בתאי CD4 T, ומתחילים שעתוק של DNA פרו-ויראלי של HIV וסינתזה של RNA נגיפיים חדשים.
ה-RNA הנגיפי וחלבוני ה-HIV יוצרים חלקיקי וירוס שמתפתחים, מדביקים תאי CD4 T חדשים ומפיצים זיהום ב-HIV.
זיהום מתקדם ב-HIV משבש את הפרשת הציטוקינים, פוגע בתגובה החיסונית נגד PfRBCs ומוביל לזיהום מלריה מתמשך.
עם הזמן, תאי דם אדומים נגועים משחררים טפילים הפולשים ל-RBCs חדשים, מתרבים טפילי מלריה ומבססים את מודל תרבית התאים של הדבקה משותפת של מלריה-HIV.
כדי להגדיר את תרביות ההדבקה המשותפת, התחל בזריעה של 1 x 106 של PBMC חיובי HIV ושלילי HIV מבודד טרי ב-100 מיקרוליטר של RPMI-S+ לבאר לתוך צלחת של 24 בארות. הביאו את הנפח הכולל של כל באר עד 500 מיקרוליטר עם 400 מיקרוליטר RPMI-S+.
לאחר מכן, בשלוש עותקים ובנפח כולל של
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים