JoVE Encyclopedia of Experiments
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:55 דק' • July 8th, 2025
התחל עם חולדה שעברה התערבות כירורגית כשבטנה חשופה.
אתר את צינור הלימפה המזנטרי העליון, השוכב בניצב לכליה הימנית וממוקם בחזית ובמקביל לעורק המזנטרי.
העבירו מלקחיים ישרים דרך מיטת השומן הפרי-כלייתי.
משוך צינורית לימפה דרך מצע השומן הפרי-כלייתי, מקם קצה אחד צמוד לצינור הלימפה ואפשר לקצה השני לבלוט מחוץ לגוף החיה.
לאחר מכן, צור חתך קטן בצינור הלימפה.
מלאו את הצינורית בתמיסה נוגדת קרישה והכניסו אותה לצינור הלימפה.
בתוך הצינור, נוזל הלימפה מכיל מספר ביומולקולות כולל גורמי קרישה המעוררים מפל של אירועים המובילים להיווצרות קרישים.
עם זאת, נוגד הקרישה נקשר לגורמי הקרישה, ומעכב את פעילותם.
זה מאפשר לנוזל הלימפה הלא קרוש לזרום בחופשיות דרך הצינורית.
מרחו דבק וטרינרי על חור הכניסה כדי להדק את הצינורית במקומה.
ביום שלפני הניתוח, חתכו את הצינוריות לאורכים המתאימים, והשתמשו בלהב כירורגי סטרילי כדי ליצור שיפוע בקצה כל פיסת צינור. לאחר מכן, להכנת הצינורית התוך-תריסריון, לולאה את הצינורית בחזרה לעצמה, ולאחר מכן, חממו את הצינורית ליצירת נקודת עיגון בצינור.
ביום הניתוח, יש לגלח את הפרווה מהצד הימני של הבטן והצוואר ואת אזורי עצם הבריח השמאלית של חולדה בוגרת מורדמת, ולאחר מכן, לנקות את אזורי הניתוח באופן אספטי עם שלוש תמיסות פובידון-יוד רצופות ו-70% קרצוף אתנול.
כדי לשרור את צינור הלימפה המזנטרי, הניחו את החיה כשצדה הימני פונה כלפי מעלה והשתמשו בלהב אזמל סטרילי כדי לפתוח את השכבה העליונה של דופן שריר הבטן עם חתך ישר של ארבעה סנטימטרים המשתרע מתהליך ה-xiphoid לאגף הימני, כשני סנטימטרים מתחת לשוליים העליונים.
החזירו את המעי הדק מתחת לדופן הבטן השמאלית, והשתמשו בשתיים עד שלוש חתיכות של גזה סטרילית רוויה במי מלח רגילים כדי לשמור אותו במקומו. לאחר מכן, גשר על החולדה מעל מזרק פלסטיק של 10 מיליליטר הממוקם אופקית מתחת לגב החיה בגובה הכליה הימנית כדי לסייע בהדמיה של צינור הלימפה המזנטרי.
אתר את צינור הלימפה המזנטרי העליון, שקוטרו כ-0.5 עד 1 מילימטר, בניצב לכליה הימנית, ומיד רוסטרלי ומקביל לעורק המזנטרי הפועם באדום כהה. שימו לב שבחולדות שאינן בצום, כפי שמוצג כאן, צינור הלימפה המזנטרי העליון הוא לבן, אטום וקל יותר לדמיין מאשר בחולדות בצום.
לאחר מכן, העבירו זוג מלקחיים ישרים דרך מצע השומן הפרי-כלייתי בשוליים התחתונים של הכליה הימנית במקביל לצינור הלימפה המזנטרי העליון, ודרך שכבות רקמת החיבור, מיד מתחת לווריד הנבוב. לאחר מכן, בעזרת קצה המלקחיים, משוך את צינורית הלימפה דרך מצע השומן הפרי-כלייתי כשקצה אחד צמוד מיד לצינור הלימפה המזנטרי, והשני יוצא מהחיה בגובה הכליה הימנית.
לאחר מכן, בעזרת מיקרוסקופ כירורגי ומלקחיים של תכשיטן, בודדו את צינור הלימפה המזנטרי דרך השכבות העליונות של רקמת החיבור והשומן על ידי דיסקציה קהה, החל מהקצה התחתון והקפידו לא לפגוע בצינור הלימפה. לאחר בידוד הצינור, השתמש בקצה המלקחיים העדינים כדי ליצור חור קטן בצינור הלימפה. לאחר שווידאתם שצינורית הלימפה מלאה לחלוטין בתמיסה נוגדת קרישה וללא פערי אוויר, השתמשו בזוג מלקחיים קטנים כדי להכניס את צינורית הלימפה כשניים עד ארבעה מילימטרים לתוך צינור הלימפה המזנטרי דרך הפנצ'ר.
אם הקנולציה תצליח, תיצפה זרימה הדרגתית של לימפה במעי מקצה האיסוף החופשי של הצינורית. כאשר זה קורה, הניחו טיפה קטנה של דבק ציאנואקרילט מעל חור הכניסה לצינור הלימפה כדי לאבטח את הצינורית, והקפידו לא לחסום את הכלי בעודף דבק.