הקמת מודל עכברי של סרטן ריאות מפושט פלאורלי
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:36 דק׳ • July 8th, 2025
כדי להתחיל, הכינו עכבר חסר חיסון.
בעזרת מכלול עם קצה מחט כפוף, הזרקו תרחיף תאי סרטן ריאות לחלל בית החזה.
תאי הסרטן מגיעים לצדר ומכילה כמות קטנה של נוזל פלאורלי.
הקולטנים של תאי סרטן אלה נקשרים לפוליסכרידים ספציפיים של ECM המיוצרים על ידי תאי המזותל המצפים את הצדר, מה שמקל על חיבור התאים למשטח הצדר.
תאי הסרטן מעבדים את הפוליסכרידים הללו, וגורמים לנדידה מוגברת של תאי סרטן לעבר פני השטח. הם גם משחררים אנזימים פרוטאוליטיים וגורמי גדילה אוטוקריניים.
אנזימים פרוטאוליטיים מפרקים את חלבוני ה-ECM, ומקדמים פלישת תאים סרטניים.
היעדר מערכת חיסון מתפקדת ונוכחותם של גורמי גדילה אוטוקריניים, מאפשרים התפשטות בלתי מוגבלת של תאי הסרטן ויוצרים גושי גידול.
עם הזמן, גושי הגידול גדלים ומתפשטים בתוך חלל הצדר, ומשבשים את מאזן הנוזלים הפיזיולוגי הרגיל.
התוצאה היא הצטברות נוזלים בחלל הצדר, מצב המכונה תפליט פלאורלי.
כדי להגדיר מודל הפצת עכברים, השתמש בקצף פוליסטירן לייצור פקק, וחטא אותו עם 70% אתנול. חבר את המחט לפקק כשהקצה משתרע 5 מילימטרים מהפקק. כופפו את קצה המחט בגודל 30 עם מלקחיים נקיים או כנגד חפץ קשיח שנוקה עם 70% אתנול, ומלאו מזרק עם 1 x 106 תאי גידול מטרה ב -100 מיקרוליטר של PBS.
אשר חוסר תגובה לרפלקס הדוושה בעכבר עירום הומוזיגוט אתימי בן 19 עד 21 גרם בן 8 עד 12 שבועות. הכנס את המחט לחזה דרך החלל הב
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים