טכניקה לגרימת יובש אוטואימוני אוטואימוני כרוני בחולדות

קחו חולדה שחוסנה בעבר בתחליב אנטיגן-אדג'ובנטי המכיל אוטואנטיגנים שמקורם בבלוטת הדמעות ואנטיגנים זרים.

הזרקה חוזרת של האמולסיה והזרקה תוך צפקית של רעלן שעלת, תוך הבטחת הפעלה מקסימלית של תאי T.

תאים מופעלים מתמיינים לתאי זיכרון אפקטור T במחזור הדם, TEMs ותאי זיכרון T שוכני רקמות, TRMs. אחוז מה-TRMs שוכן ברקמות פני העין.

לאחר מרווח מוגדר, יש להזריק את האנטיגנים לתת-הלחמית ולבלוטות הדמעות, ולגרום לדלקת מקומית.

תאים מציגי אנטיגן תת-לחמית, APCs, מציגים אנטיגנים ל-TRMs, ומעוררים שחרור ציטוקינים.

ציטוקינים גורמים לתאי אפיתל הלחמית לשחרר כימוקינים, המגייסים TEMs.

APCs מפעילים מחדש את ה-TEMs שחדרו, ומפעילים שחרור ציטוקינים פרו-דלקתיים.

ציטוקינים גורמים למוות של תאי גביע הלחמית המייצרים מוצין, מפחיתים את רמות המוצין וגורמים לחוסר יציבות של סרט הדמעות.

ציטוקינים גורמים למוות של תאי בלוטת הדמעות - ומפחיתים את ייצור הדמעות - וממריצים את תאי האפיתל של הקרנית לייצר מטריצות מטאלופרוטאינאזות, מה שפוגע בקרנית.

העריכו את החולדה עבור המאפיינים הקליניים המצביעים על השראת עין יבשה מוצלחת.

ביום האפס, יש לחלק 200 מיקרוליטר של האמולסיה המכילה מיליגרם אחד של תמצית בלוטת הדמעות ו-200 מיקרוגרם של אובאלבומין, ולהשלים את האדג'ובנט של פרוינד למזרקי Luer-lock של 1 מיליליטר, ולצייד את המזרקים במחטים בגודל 27.

ללא שימוש בהרדמה, יש להזריק תת עורית את האמולסיה בבסיס זנבות החולדה. לאחר מכן, ביום ה-14 באופן דומה, הזריקו 200 מיקרוליטר מאותו אנטיגן ואדג'ובנט פרוינד לא שלם. באותו יום, יש להזריק תוך צפקית 300 ננוגרם של רעלן שעלת ב-100 מיקרוליטר PBS.

ביום ה-48, שקלו את הכמות הנדרשת של אובאלבומין והמיסו אותה ב-PBS, ולאחר מכן, שלבו אובאלבומין עם תמצית בלוטת הדמעות שהוכנה מוקדם יותר בסרטון זה, וצרו תמיסת אנטיגן המכילה 1 מיליגרם למיליליטר אובאלבומין ו-1 מיליגרם למיליליטר תמצית בלוטת הדמעות.

לאחר הרדמת החולדות, יש להזריק 5 מיקרוליטר אנטיגן לתת-קונג'וקטיבה הפורניקאלית של העין, ולאחר מכן להזריק 20 מיקרוליטר אנטיגן לבלוטת הדמעות.