בדיקת עיכוב Hemagglutination לאיתור נוגדנים בסרום כנגד אנטיגן מטרה
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:59 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם צלחת תחתונה מרובת בארות בצורת V והוסף לבאר הבדיקה סרום מדולל מאדם מחוסן נגד שפעת המכיל נוגדנים ספציפיים לשפעת.
הכנס המגלוטינין ויראלי - אנטיגן ספציפי לשפעת בבארות הבדיקה והבקרה.
במהלך הדגירה, בבאר הבדיקה, נוגדנים ספציפיים לשפעת מקיימים אינטראקציה עם אנטיגנים ויוצרים קומפלקסים. בעודם בבאר הבקרה, אנטיגנים נשארים לא קשורים.
דגרו על הבארות עם תאי דם אדומים של עופות או RBCs.
בבאר הבקרה, אנטיגנים חופשיים מקיימים אינטראקציה עם קולטני פני השטח של RBC הספציפיים להמגלוטינין נגיפי, גורמים ל-RBCs להתגבש, מה שמוביל להמגלוטינציה ויוצר דפוס קומפקטי בתחתית הבאר.
עם זאת, בבאר הבדיקה, נוכחותם של קומפלקסים של אנטיגן-נוגדנים והיעדר אנטיגנים חופשיים מעכבים את ההמגלוטינציה, ומיישבים RBCs בתחתית.
לאחר הבדיקה, הטה את הצלחת. באר הבקרה מציגה דפוס מעגלי קטן וקומפקטי עם מראה מעורפל - המעיד על המגלוטינציה.
לעומת זאת, באר הבדיקה מראה דפוס מפוזר דמוי דמעות, מה שמרמז על עיכוב המגלוטינציה.
התחל בתיוג לוחות מיקרוטיטר של 96 בארות עם המידע הניסיוני המתאים. לאחר מכן, סובב את הצלחת בכיוון האנכי והשתמש בפיפטה רב-ערוצית כדי להוסיף 25 מיקרוליטר PBS לכל באר מלבד הבאר הראשונה בשורת הטיטרציה האחורית התחתונה. הוסף 50 מיקרוליטר מתמיסת האנטיגן הטרייה שהוכנה מעניינת לבאר הראשונה של שורת הטיטרציה האחורית, ואחריה תוספת של
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים