אינדוקציה של דלקת מעיים נמקית במודל אנטרואיד אפיתל אנושי

השג קריפטות אנושיות שמקורן ברקמת המעי הדק - פלישות צינוריות המכילות תאי גזע וסוגים שונים של תאי אפיתל.

הוסף את קריפטות המעיים למטריצת מרתף צוננת.

העבירו את התערובת הזו לצלחת מרובת בארות, וצרו כיפה תלת מימדית.

הוסף מצע גידול ודגירה.

תאי גזע מתארגנים בעצמם, מתרבים ומתמיינים למספר סוגים של תאי מעיים, ויוצרים אנטרוספירה.

עם הזמן, האנטרוספירות מבשילות לאנטרואידים - מבנים תלת מימדיים המתחדשים מעצמם, הדומים לקריפטות המעי.

הוסף ליפופוליסכרידים, או LPS, אנדוטוקסין חיידקי, לבאר המכילה אנטרואיד ודגר.

מולקולות LPS נקשרות לקולטן דמוי האגרה באנטרואיד, ויוזמות תגובה פרו-דלקתית, וכתוצאה מכך הצטברות של מיני חמצן תגובתיים. זה מעורר שרשרת של אירועים המובילים לאפופטוזיס.

כתוצאה מכך, שלמות האנטרואיד נפגעת, מה שמוביל לחדירת LPS ללומן, מה שמעצים עוד יותר את התגובה הדלקתית.

זה מחקה התפתחות של דלקת מעי נמקית, דלקת קשה במעיים של פגים.

בזמן האיסוף בסוויטה הניתוחית, הנח את דגימת רקמת המעי הדק האנושית ב-DPBS קר. שטפו את הדגימה ב-DPBS הקר עד שהיא נקייה מדם וצואה.

אחסן את הדגימה במדיום RPMI 1640 בארבע מעלות צלזיוס עד שתהיה מוכנה לבידוד קריפטה. כאשר אתה מוכן להמשיך, בדוק שוב כדי לוודא שהדגימה נקייה מצואה ודם. בעזרת מספריים מנתחים עדינים, הסר עודפי שומן או קליפסים וסיכות כירורגיים. שקלו את הדגימה, וכוונו לחתיכה שמ