אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 5:29 דק׳ • July 8th, 2025
קח שקופית זרימה המכילה שכבת שומנים דו-שכבתית, או SLB.
ה-SLB מצומד לליגנדים ספציפיים - מולקולת הידבקות בין-תאית 1 או ICAM-1 ונוגדנים נגד CD3 - המסומנים בפלואורופורים.
הוסף תאי T ואנטי-CD107a Fab מתויג פלואורופור - מקטע קושר האנטיגן של נוגדן כנגד סמן הדגרנולציה.
קומפלקס הקולטן של תאי T-CD3 או TCR-CD3 נקשר לנוגדנים נגד CD3, ומפעיל את ה-TCR.
איתות מבפנים החוצה המושרה על ידי הפעלה מפעיל אינטגרינים על פני השטח, הנקשרים ל-ICAM-1 המשותק.
ההצמדה גורמת לארגון מחדש של השלד הציטו-צינורי - סידור מחדש של מיקרו-צינוריות, ופילמור אקטין שמוביל להתפשטות רוחבית של התא על פני השטח של SLB.
ההתפשטות מאפשרת ליותר אינטראקציות של ליגנד-קולטן ליצור אשכול הפעלה סופרמולקולרי או SMAC, וליצור סינפסה חיסונית.
גרגירים ליטיים של תאי T נעים לאורך מיקרו-צינורות ומתמזגים עם קרום הפלזמה, וחושפים סמני דה-גרנולציה על פני התא, הנקשרים ל-Anti-CD107a Fab.
באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי, דמיין את הסינפסה החיסונית המועשרת במתחמי TCR-CD3, אינטגרינים וסמני דה-גרנולציה.
התחל בשימוש במלקחיים מסוג מספריים מפוליפרופילן כדי לטבול כיסויי זכוכית בתמיסת פיראנה חומצית טרייה שהוכנה למשך 25 עד 30 דקות. בתום הכביסה, שטפו את הכיסויים שבע פעמים בנפח טרי של מים טהורים במיוחד לכל כביסה, והניחו את הכיסויים הרטובים בצד כדי לאפשר למים הנותרים להת
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים