אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:40 דק׳ • July 8th, 2025
התחל בהוספת חומר פרמקולוגי אימונומודולטורי לתאים דנדריטיים לא בשלים, או DCs.
DCs מבטאים קומפלקס תאימות היסטולוגי עיקרי, או מולקולת MHC class-II ומולקולות קו-גירוי, חיוניים לקידום התפשטות תאי T במהלך תגובות חיסוניות.
החומר האימונומודולטורי מתקשר עם ה-DC ומפעיל את הפחתת הוויסות של ביטוי מולקולות MHC class-II ומולקולות קו-סטימולטוריות, ובכך הופך את ה-DC לתא דנדריטי טולרוגני או TolDC.
תרבית משותפת של TolDCs עם תאי CD4+ T נאיביים.
הוסף פפטיד אנטיגני לתרבית המשותפת.
TolDCs מפנימים את הפפטיד, ולאחר מכן מעבדים ומעמיסים את האנטיגן המתקבל על מולקולת ה-MHC.
מולקולת ה-MHC הקשורה לאנטיגן עוברת לקרום התא.
תאי CD4+ T נאיביים מקיימים אינטראקציה ישירה עם קומפלקס האנטיגן-MHC ב-TolDCs.
האינטראקציה עם מולקולת הגירוי המשותף על ה-DC הבוגר מאפשרת הפעלה מלאה של תא ה-T הנאיבי.
ללא גירוי משותף, תא ה-CD4+ T הנאיבי נשאר רדום ואינו יכול ליזום תגובה חיסונית כנגד האנטיגן המוצג.
השעו מחדש את התאים בריכוז של 2 x 105 תאים דנדריטיים למיליליטר, וטפלו בהם בריכוז הניסוי המתאים של הטריטרפנואיד המעניין למשך שעה אחת ב-37 מעלות צלזיוס.
במהלך השליש האחרון של הדגירה, השעו מחדש את תאי ה-T בריכוז של 1 x 107 תאים למיליליטר ו-CFSE מיקרו-מולרי אחד למשך 15 דקות ב-37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, שטפו את התאים עם PBS והתאימו מחדש את הנפח
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים