טכניקת כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל לטיהור שלפוחיות חוץ-תאיות מיקובקטריאליות

קח עמודת כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל עמוסה במטריצה אינרטית של חלקיקי שרף פוליסכריד. לחלקיקים הנקבוביים יש גודל נקבוביות מוגדר.

שטוף את העמוד עם מאגר שיווי משקל לטיהור אופטימלי.

הוסף תסנין תרבית מרוכז המעובד מתרבית של Mycobacterium tuberculosis - חיידק פתוגני. התסנין מכיל שלפוחיות חוץ-תאיות, או EVs, וחלבונים מסיסים אחרים המופרשים על ידי החיידקים.

רכבים חשמליים הם מבנים כדוריים קטנים בגודל הטרוגני. הם מכילים מקרומולקולות וגורמי אלימות הסגורים בשכבת שומנים.

הדגימה נכנסת למטריצה בכוח הכבידה. הוסף את המאגר כדי לאפשר תנועה לדוגמה דרך העמודה.

ה-EVs אינם יכולים להיכנס לשרף בגלל גודל הנקבוביות הקטן ובמקום זאת נעים דרך החלל הבין-חלקיקי, נוסעים בנתיב קצר יותר ויוצאים ראשונים.

חלבונים, בעלי גודל קטן יותר, נכנסים לנקבוביות, עוברים נתיב ארוך יותר דרך השרף ונעלמים בקצה.

אסוף את השברים המכילים EVs לניתוח במורד הזרם.

אפשר לכרומטוגרפיה של אי הכללת הגודל, או לעמודת SEC, להתאזן לטמפרטורת החדר. הפעל את ה-AFC באמצעות מתג ההפעלה בגב יחידת המגדל, ולחץ על SETUP במסך המגע של התפריט הראשי במידת הצורך כדי להתאים את ההגדרות עבור תא העומס. ממסך ההגדרה, יישר את הקרוסלה על ידי בחירה בקרוסלה ואחריה כיול. הכנס את הקרוסלה עם 13 החורים הקטנים הפונים כלפי מעלה לתוך מגדל ה-AFC, והתאם את הקרוסלה על ידי לחיצה על כפתורי