אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:58 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם זחלי דג זברה טרנסגניים המבטאים תאים חיסוניים בעלי תווית פלואורסצנטית המתויגים בסמנים פלואורסצנטיים ייחודיים למעקב מדויק.
הזחלים מוזרקים מראש עם חלבון פלואורסצנטי אדום המבטא נבגי אספרגילוס, במוח האחורי שלהם.
בתוך המוח האחורי, נבגי הפטרייה מחקים דלקת מקומית ומושכים תאים חיסוניים, כולל מקרופאגים, אשר פגוציטוז נבגים לסילוקם.
בעוד שכמה נבגים נמשכים ונובטים לקורים, משחררים מולקולות שמקורן בפתוגן ומושכים נויטרופילים לאתר הזיהום.
העבירו זחל מורדם לתא הטעינה המכיל מדיום של מכשיר הפציעה והלכידה של דג הזברה לצמיחה והדמיה, או zWEDGI, מכשיר המחובר לתא הפציעה באמצעות תעלת הגבלה.
אבטח את הזחל בתוך תעלת ההגבלה בכיוון גבי-רוחבי להדמיית המוח האחורי.
בשלבים המוקדמים, פלואורסצנציה אדומה מייצגת את נבגי הפטרייה, בעוד שהפלואורסצנציה הירוקה מאשרת גיוס מקרופאגים לאתר ההדבקה.
עם הזמן, התפשטות הקרינה האדומה מסמלת התקדמות זיהום, בעוד שהופעת פלואורסצנציה כחולה נוספת מעידה על גיוס נויטרופילים.
ביום ההדמיה, הכינו צלחת פטרי אחת בגודל 3.5 מילימטר עם 100 PTU מיקרומולר ואחת עם E3-tricaine. הוסף E3-tricaine לתאים של מכשיר zWEDGI, והשתמש במיקרופיפטה P100 כדי להסיר בועות אוויר מהתאים ומתעלת הריסון, ולאחר מכן, הסר את כל עודפי ה-E3-tricaine מחוץ לתאים.
פיפטו זחל אחד והעבירו אותו לכלי עם ה-E3 PTU, ואז העבירו אותו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים