טכניקת הפוטו-המרה לחקר דינמיקה של תאים דלקתיים בגלמי חרקים

התחל עם צלחת עם תחתית זכוכית המכילה גלמי דרוזופילה טרנסגניים הנושאים אפיתל פצוע מסומן עם חלבוני פני התא שלהם המציגים פלואורסצנטיות ירוקה.

תאי החיסון של הגלמים - או המוציטים מבטאים פלואורופורים ירוקים הניתנים להמרה בציטופלזמה וחלבונים פלואורסצנטיים אדומים בגרעין, מה שמקל על מעקב אחר התאים.

התאים הפצועים משחררים חומרים כימואטרקטיביים - או מולקולות דלקתיות, המושכים את ההמוציטים לאתר הפצוע.

מיקרוסקופיה קונפוקלית חושפת את האזור הפצוע המוקף בתאי אפיתל ירוקים.

במהלך הריפוי, המוציטים ירוקים עם גרעינים אדומים ליד הפצע מרחיבים את בליטות הממברנה - פילופודיה ולמליפודיה ונודדים לכיוון האזור הפצוע.

עם הזמן, כאשר החומר הכימואטרקטיבי מתפזר, המוציטים מרוחקים נודדים לעבר הפצע ויוצרים גל של תאים חיסוניים.

להאיר את תת-האוכלוסייה של המוציטים נודדים באורך גל של 405 ננומטר. זה ממיר באופן בלתי הפיך את הפלואורופור הניתן להמרה של ההמוציטים מירוק לאדום.

המוציטים אלה שהומרו לאור מתקנים את האפיתל הפצוע ומתרחקים מאתר הפצע, מבדילים את ההמוציטים המומרים לאור מהמוציטים שאינם מומרים לאור, ומבהירים את הדינמיקה של תאים דלקתיים.

לאחר פציעה בשולי כנפי האישון, העבירו במהירות את הצלחת עם תחתית הזכוכית למיקרוסקופ מתאים להדמיית זמן-lapse. לאחר מכן, פתח את תוכנת לכידת התמונות המתאימה.

בתוכנה, הפעל את הלייזרים המתאימים, והתא