אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:59 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם צינורות המכילים דם מלא אנושי, כולל תאי דם אדומים, או RBCs, ותאי דם לבנים, או WBCs, כגון מונוציטים וגרנולוציטים, ותאי דם אחרים.
הכניסו דיהידרואתידיום - אינדיקטור סופראוקסיד וחיידקים ללא תווית לתוך שפופרת אחת. טפל בצינור השני בחיידקים ירוקים עם תווית פלואורופור.
גרנולוציטים ומונוציטים מקיימים אינטראקציה עם המולקולות הקשורות לפתוגן של החיידקים, ובולעים אותם בתוך פגוזומים.
זה מפעיל את אנזים הממברנה הפגוזומלי NADPH אוקסידאז, ומפחית חמצן מולקולרי לאניון סופראוקסיד.
אניון הסופראוקסיד מייצר עוד יותר מי חמצן - מין חמצן תגובתי, או ROS וכתוצאה מכך פרץ חמצוני.
בתוך הפאגוזום, ROS מחמצן דיהידרואתידיום ליצירת 2-הידרוקסי אתידיום, אשר מכתים את ה-DNA החיידקי, ומעניק פלואורסצנטיות אדומה.
הכניסו מרווה, כדי להרוות את הקרינה החוץ-תאית.
הוסף פתרון ליזינג, בטל הפרעות RBC פוטנציאליות ותקן את ה-WBCs.
בציטומטריית זרימה, תאים עם פלואורסצנטיות ירוקה מאשרים את הפעילות הפגוציטית של גרנולוציטים ומונוציטים, בעוד שתאים עם פלואורסצנטיות אדומה בצינור אחר מצביעים על פעילות פרץ חמצן בתאים אלה.
לפני תחילת ההליך, השתמש במנתח המטולוגי כדי לבצע ספירת דם מלאה עם ניתוח דיפרנציאלי של תאי דם לבנים על דגימות הדם, בהתאם להוראות היצרן. רשום את ספירת תאי הדם הלבנים בתאים למיליליטר ואת אחוז ערכי הנויטרופילים והמונוציטים עבו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים