בדיקת מיקרו-נטרול למדידת נוגדנים מנטרלים בסרום אנושי

לבדיקת מיקרו-נטרוליזציה, קח צלחת מרובת בארות המכילה סרום אנושי מדולל בחום עם ריכוזים פוחתים של נוגדנים מנטרלים ספציפיים לשפעת.

להציג נגיפי שפעת פתוגניים. נוגדנים בסרום מקיימים אינטראקציה עם הנגיפים ומנטרלים אותם; עם זאת, דילולים גבוהים יותר בסרום מציגים נטרול מוגבל של הנגיף.

זרע עם תאי כליה של Madine-Darby, או תאי MDCK, המבטאים יתר על המידה שאריות חומצה סיאלית אנושית על פני השטח שלהם.

בדילול הגבוה יותר, נגיפי שפעת לא מנוטרלים מתמזגים עם החומצה הסיאלית של התאים, ומשחררים את הגנום הנגיפי לציטופלזמה של התא.

הגנים הנגיפיים משועתקים ומתורגמים לחלבונים נגיפיים ונוקלאופרוטאינים בתוך התא המארח.

טפל בריכוז גבוה של אצטון לקיבוע וחדירה.

להציג נוגדנים ראשוניים המקיימים אינטראקציה עם נוקלאופרוטאינים נגיפיים.

שכבת נוגדנים משניים מצומדים לאנזים המקיימים אינטראקציה עם נוגדנים ראשוניים. שוטפים ומטפלים במצע האנזים, ומייצרים מוצר צבעוני.

כמת את עוצמות הצבע ושרטט אותן מול דילול הסרום; הדילול הגבוה ביותר בסרום, השגת חמישים אחוז נטרול הנגיף מייצג את טיטר הנטרול.

ביום הראשון של בדיקת MN, יש להפשיר את הסרום באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס, ולהוציא מיד לאחר ההפשרה. השבת את הסרום האנושי למשך 30 דקות באמבט מים של 56 מעלות צלזיוס, כמתואר בפרוטוקול הטקסט. לאחר מכן, הניחו את הסרום על קרח, והוסיפו את מדלל הנגיף לסר