מדידת עיכוב של צמיחת שתילים על ידי מערכת החיסון

השתל שתילים לבארות המכילות ריכוזים רצויים של פפטיד מעורר חיסון - מקטע חלבון שמקורו במולקולות הקשורות לפתוגן.

פפטיד זה נקשר לקולטני זיהוי הדפוסים, או PRRs, על תאי הצמח, ויוזם מפל איתות.

מפל זה כולל זרחון של הומולוג אוקסידאז מתפרץ נשימתי, או חלבוני RBOH, שהופכים לפעילים אנזימטית ומזרזים את הייצור של מיני חמצן תגובתיים או ROS.

ROS פועלים כשליחים משניים במסלולי איתות חיסוניים, מגבירים את תגובת ההגנה המופעלת על ידי PRRs, ומתפקדים כחומרים אנטי-מיקרוביאליים ישירים, המעכבים את צמיחת הפתוגנים על ידי פגיעה במרכיביהם התאיים.

במהלך ייצור ROS, הצמח מקצה אנרגיה וחומרים מזינים כדי לתמוך בתגובה החיסונית שלו, ומסיט משאבים מתהליכים הקשורים לגדילה הגורמים לעיכוב גדילה.

קבע את אחוז עיכוב הצמיחה בשתילים שטופלו באליצרטור בהשוואה לשתילים לא מטופלים על ידי מתאם המשקלים הטריים שלהם.

ריכוזים הולכים וגדלים של מעוררי פפטידים מעכבים את צמיחת השתילים עקב תגובות חיסוניות מוגברות ושינויים ביוכימיים נלווים.

ארבעה ימים לאחר הסיום, טען כל באר של צלחת של 48 בארות ב-500 מיקרוליטר של מדיום MS בתוספת דילול של פפטיד מעורר. לאחר מכן, השתמש במלקחיים סטריליים כדי להשתיל בזהירות שישה עד שמונה שתילים באותו גודל, גיל וגנוטיפ לכל דילול פפטיד, תוך הקפדה על כך שלא ייגרם נזק לשתיל או שבירה של השורש ושהשורש יהיה שקוע במדיום.

לאחר ש