אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:30 דק׳ • July 8th, 2025
התחילו עם כדוריות דם אדומות, או RBCs.
הוסף נוגדנים רב-שבטיים ספציפיים לאנטיגנים על פני השטח של RBC.
דגירה. הנוגדנים מתנגדים ל-RBC על ידי ציפוי שלהם באמצעות קשירה ספציפית לאנטיגנים על פני השטח.
צנטריפוגה והסר את הנוגדנים הלא קשורים.
הוסף את ה-RBCs המושעיים על ידי נוגדנים לשקופית רב-תאית המכילה חד-שכבות מונוציטים. דגירה.
קולטני הגמא Fc על פני השטח על מונוציטים נקשרים לאזור Fc של נוגדנים רב-שבטיים הקשורים ל-RBCs.
קשירה זו גורמת לקולטן Fc להתקבץ סביב אזור המגע ומפעילה איתות תוך-תאי, וכתוצאה מכך ארגון מחדש של שלד הציטו של אקטין במונוציטים.
סידור מחדש זה של שלד הציטו גורם להרחבות פסאודופודים ויוצר פגוציטית סביב RBCs אופסוניים.
הכוס הפגוציטית סוגרת בהדרגה RBCs אופסוניים, מה שמוביל לבליעתם המלאה בתוך פגוזום הקשור לממברנה.
לאחר הדגירה, שטפו את השקופית עם חיץ כדי להסיר RBCs שאינם פגוציטוזים. תקן את התאים.
הרכיב את המגלשה באמצעות אמצעי הרכבה.
בצע מיקרוסקופ ניגודיות פאזה כדי לדמיין ולכמת את ה-RBCs הפגוציטוזיים בתוך מונוציטים.
כדי להגדיל את תאי הדם האדומים R2R2, ראשית, יש לשטוף את כדוריות הדם האדומות שלוש פעמים ב-PBS. לדלל את גלולת R2R2 לאחר הצנטריפוגה השלישית ביחס של אחד לאחד עם נוגדנים אנטי-D רב-שבטיים מסרום אנושי למשך שעה אחת ב-3 מעלות צלזיוס עם ערבוב לסירוגין. בתום האופסוניזציה, הוציאו את ה
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים