אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:11 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם מדיום תרבית תאים המכיל E-Plate - צלחת עם מיקרואלקטרודות זהב בתחתית כל באר.
זרעו את הצלחת בתאי סרטן מטרה, נצמדים למיקרואלקטרודות הזהב, ויוצרים מחסום פיזי בין האלקטרודות.
העבר את הצלחת למנתח תאים והפעל אות חשמלי.
תאים דבוקים משבשים את זרימת האלקטרונים בין האלקטרודות, וכתוצאה מכך זרימת אלקטרונים מעוכבת, הנמדדת כעכבה.
כאשר תאים אלה מתרבים ונצמדים לאלקטרודות, העכבה החשמלית גדלה באופן פרופורציונלי למספר התאים הדבקים, ומאפשרת מדידה בזמן אמת.
הציגו תאי T של קולטני אנטיגן כימריים או תאי CAR T המבטאים קולטני אנטיגן כימריים. קולטנים אלה מקיימים אינטראקציה עם האנטיגנים של תאי הסרטן, מפעילים תאי T ויוצרים סינפסה אימונולוגית.
תאי CAR T מופעלים משחררים חומרים ציטוטוקסיים, כולל פרפורינים וגרנזימים.
פרפורינים יוצרים נקבוביות בקרום התא הסרטני, מה שמאפשר לגראנזימים להיכנס לתאים ולגרום לציטוליזה.
זה מקדם ניתוק תאים, מפחית את העכבה החשמלית, בקורלציה עם פוטנציאל הציטוליזה של תאי CAR T.
לבדיקת עוצמת ציטוליזה בזמן אמת, הוסף 50 עד 100 מיקרוליטר של מדיום תרבית תאי מטרה לכל באר של צלחת E, ומדוד את עכבת הרקע במכשיר מנתח התאים.
נתק את תאי סרטן המטרה מלוח התרבית באמצעות טריפסין. שוטפים את התאים ב -15 מיליליטר מדיום תרבית טרי וצנטריפוגה. השעו מחדש את גלולת התא הסרטני ב-5 מיליליטר של מדיום טרי לספירה והתא
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים