אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 5:16 דק׳ • July 8th, 2025
התחל בהוספת אנטיגנים של חיסון הבדיקה לתרבית התאים הדנדריטיים.
התא הדנדריטי מזהה את האנטיגן, מפנים אותו באמצעות אנדוציטוזיס בתיווך קולטנים, מפצל אותו לפפטידים קטנים יותר ומעביר את קומפלקס האנטיגן-MHC שנוצר אל פני התא לצורך הצגה.
תרבית משותפת של תאים דנדריטיים המציגים אנטיגן עם לימפוציטים T נאיביים כדי לאפשר אינטראקציה בין קולטן תאי T לקומפלקס האנטיגן-MHC, יחד עם הקולטנים המשותפים שלהם.
זה מוביל להיווצרות סינפסות אימונולוגיות, המפעילות לימפוציטים מסוג T באמצעות איתות תוך-תאי.
לימפוציטים T מופעלים עוברים התרחבות משובטת, ויוצרים לימפוציטים T אפקטיביים.
הוסף מולקולות ציטוקין אינטרלוקין-2, או IL-2, לתרבית ודגירה. הקישור של IL-2 מפעיל איתות תוך-תאי, המאפשר התפשטות והישרדות של לימפוציטים.
קח נפח קטן של התרבות והצנטריפוגה. השליכו את הסופרנטנט. השעו מחדש את כדור התא עם תאים דנדריטיים המציגים אנטיגן והעבירו אותו לאותה באר.
גירוי מחדש עם אנטיגן מגביר את התפשטות הלימפוציטים.
בצע ניתוח במורד הזרם כדי לכמת סמנים ספציפיים הקשורים להתפשטות לימפוציטים.
כדי לייצר MoDCs פועמים אנטיגן, הוסף 1 מיקרוליטר למיליליטר של חיסון נגד נגיף הכלבת או תרחיף קרוואנים ל-1 מיליליטר של תרבית MoDC נאיבית בצלחת של 24 בארות, ודגר את הצלחת למשך 48 שעות ב-5% פחמן דו חמצני ו-37 מעלות צלזיוס. ביום השביעי, שמור את צלחת 24 הבאר
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים